科研产出
大豆种质对胞囊线虫1号小种抗性的SSR标记辅助鉴定
《山东农业科学 》 2015
摘要：本研究以15份大豆种质为材料,采用抗病基因型鉴定和人工接种鉴定的方法,探讨了Satt309和Sat_210标记对胞囊线虫1号小种抗性的选择效率。结果表明,Satt309对胞囊线虫1号小种抗性的选择效率为50%,Sat_210对胞囊线虫1号小种抗性的选择效率为87.5%,Satt309和Sat_210的标记组合可以提高对胞囊线虫1号小种抗性的选择效率,达100%;获得8份抗胞囊线虫1号小种的大豆种质,分别是Peking、高作选1号、齐黄28、齐黄30、齐黄33、齐黄29、齐黄31和沧豆11。
关键词： 大豆胞囊线虫病1号小种 分子标记 抗性鉴定
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钙镁钾肥在盐碱地棉花上的应用效果初探
《中国棉花杂志社 》 2015 CSCD
摘要：为了探讨盐碱地棉花施用钙镁钾肥的效果,指导盐碱地改良和棉花合理施肥,在滨海盐碱地棉田种植转Bt基因抗虫棉鲁棉研28,研究钙镁钾肥施用对其生长发育和产量的影响。结果表明,钙镁钾肥的合理施用明显提高了棉花的抗逆性,促进了棉花生长发育,显著增加了棉花产量。棉花皮棉产量以在常规施肥量的基础上,每667m~2加施钙镁钾肥50kg的处理较高,比对照(CK)增加6.9%,差异达显著水平。其他处理均比CK增产,但差异不显著。表明合理增施钙镁钾肥,对改良盐碱地土壤、提高棉花抗逆性、增加产量均具有积极作用。
马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价
《园艺学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12~15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100~300 kb片段,连接到载体Copy ControlTM p CC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。
2012年鲍氏不动杆菌的多药耐药性与NDM-1基因分析
《中华医院感染学杂志 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：目的检测2012年1-9月淄博市中心医院鲍氏不动杆菌耐药性及多药耐药菌株携带NDM-1基因,并与全国耐药性水平比较,评价医院严格控制抗菌药物使用的效果。方法选择2012年1-9月医院住院患者的痰液、脓液及血液等临床标本中分离出的251株鲍氏不动杆菌,采用VITEK-2Compact自动微生物鉴定系统检测鲍氏不动杆菌对抗菌药物的耐药性,并检测多药耐药菌是否携带NDM-1基因。结果 251株鲍氏不动杆菌主要来自患者痰液和咽拭子,分别占53.78和19.52%;其对氨苄西林、头孢类抗菌药物耐药率达100.00%,对氨曲南、头孢曲松、环丙沙星、庆大霉素、头孢吡肟、氨苄西林/舒巴坦、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、亚胺培南、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为50.00%~60.00%,对头孢他啶、左氧氟沙星、阿米卡星耐药率为20.00%~40.00%;2012年医院严格按照《抗菌药物临床应用指导原则》和药敏试验结果用药,各季度鲍氏不动杆菌耐药率对氨苄西林、头孢替坦、头孢唑林、呋喃妥因一直保持100.00%高耐药率,其他抗菌药物在二季度略有降低,而到三季度降低明显,差异有统计学意义(χ2=6.731,P<0.05);鲍氏不动杆菌多耐药菌均不携带NDM-1基因。结论淄博市中心医院严格按照《抗菌药物临床应用指导原则》和药敏试验结果用药,取得较好的治疗效果,鲍氏不动杆菌耐药率逐渐下降。
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棉花转录因子基因(GhMYB11)的克隆与表达分析
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：MYB基因家族在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中有重要的调控作用。本研究利用二倍体雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii)基因组数据库,从陆地棉(G.hirsutum)品种鲁棉研32号中克隆到一个新的MYB转录因子Gh MYB11(Gen Bank登录号:HQ234875.1),c DNA全长1 001 bp,开放阅读框828bp。通过与模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和主要作物小麦(Triticum aestivum L.)、玉米(Zea mays L.)、水稻(Oryza sativa L.)MYB蛋白的氨基酸序列比对发现,Gh MYB11蛋白与拟南芥中脱落酸(abscisic acid,ABA)合成和信号传导的重要基因At MYB13/14编码的蛋白高度相似(E值分别为7e-83和1e-90),含两个高度保守的MYB结构域R2R3及一个转录激活结构域。实时定量PCR分析发现,Gh MYB11基因在黄萎病菌(Verticillium dahliae)侵染、干旱、盐和氧化胁迫处理后的棉花幼苗叶片中表达显著上调。Gh MYB11基因可能在棉花生物和非生物胁迫反应中起重要调控作用,是陆地棉品种抗逆性遗传改良的重要候选基因。本研究为利用基因工程手段提高棉花抗逆性提供了基础材料
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棉花GhSRO04/GhSRO08基因的克隆及表达分析
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：SRO转录因子在植物响应盐、旱和病菌等生物和非生物胁迫中具有重要的调节作用。本研究从抗枯萎病耐黄萎病的棉花品种鲁研棉32号中克隆获得2个基因:命名为GhSRO04和GhSRO08(Gen Bank登录号为KR534896和KR534895)。结果显示:GhSRO04包含一个最大开放阅读框1830 bp(ORF),推测编码609个氨基酸;GhSRO08包含一个最大开放阅读框1 842 bp(ORF),推测编码编码613个氨基酸。比对分析表明GhSRO04和GhSRO08基因均含有RCD1-SRO-TAF4结构域(RST)。系统进化树分析表明,GhSRO04和GhSRO08编码产物与拟南芥RCD1和SRO1亲缘关系最近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析基因表达显示,GhSRO04和GhSRO08基因均受黄萎病菌侵染、干旱和高盐诱导表达,表明GhSRO04和GhSRO08在棉花应对盐、旱和病菌胁迫中可能起着重要的调节作用,对棉花种质的抗逆性遗传改良具有潜在利用价值。本研究首次从棉花中分离鉴定出SRO类转录因子,并进行了初步功能分析,为棉花遗传改良储备了基因资源。
关键词： 棉花 GhSRO04/GhSRO08 SRO 基因表达 抗逆
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马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价
《园艺学报 》 2015 CSCD
摘要：以四倍体马铃薯栽培品种'合作88'培养12 ~ 15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100 ~ 300 kb片段,连接到载体CopyControl~(TM)pCC1BAC~(TM)的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。
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野生花生全基因组抗病相关LOX基因的生物信息学分析
《山东农业科学 》 2015
摘要：脂肪氧合酶(lipoxygenases,LOX)是生物体内一种重要的双加氧酶,其在植物发育以及响应生物和非生物胁迫时发挥重要作用。本研究从Arachis duranensis和Arachis ipaёnsis两个野生花生基因组中各鉴定出18个LOX基因,分别命名为Ad LOX1~18和Ai LOX1~18。在Ad LOX5、Ad LOX7、Ai LOX8和Ai LOX18基因的CDS序列中发现提前终止翻译的终止密码子,而Ai LOX9基因的CDS序列过短,推测这些基因可能是假基因。染色体定位结果显示,Ad LOX和Ai LOX基因主要分布在2、3、6、8、9和10号染色体上,且其直系同源基因分布在两套染色体相同或相近的位置。通过分析Ad LOX和Ai LOX基因与已知功能LOX基因的亲缘关系发现,AdLOX6、Ad LOX9、Ad LOX11、Ad LOX12、Ad LOX17、Ai LOX1、Ai LOX4、Ai LOX6、Ai LOX16和Ai LOX17基因可能参与花生的抗病过程,启动子分析结果也支持这一结论。基因选择压力研究表明,Ad LOX和Ai LOX基因在进化历程中受到纯化选择。
关键词： 野生花生 LOX基因家族 抗病 系统发育 选择压力
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抑制E.coli的SOS应答对恩诺沙星抗药性的影响
《中国科学:生命科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：通过敲除SOS应答启动蛋白基因rec A,探讨SOS应答对E.coli恩诺沙星抗药性的影响,并体外评价Rec A抑制剂和恩诺沙星联用对细菌协同抑制作用的影响.利用Red重组系统,构建E.coli ATCC 25922的rec A缺失菌株E.coli ATCC 25922/?rec A;在恩诺沙星压力下,利用荧光定量PCR测定SOS应答系统相关基因rec A和umu C表达量的变化.用微量肉汤稀释法测定恩诺沙星等常用抗生素对两个菌株的MIC变化;利用梯度平板法测定恩诺沙星对两个菌株抗药性变异的影响;合成Rec A抑制剂,并评估其与恩诺沙星联合抑制E.coli生长及其抗药性的作用.结果表明,E.coli ATCC 25922/?rec A菌株对恩诺沙星的最低抑菌浓度值降低至原始菌株的1/8;经药物处理后,在梯度平板上,rec A缺失菌株较野生型不易产生抗药性;荧光定量PCR表明,rec A缺失菌株或在Rec A抑制剂作用下,SOS应答系统受到一定的抑制.敲除rec A,使菌株对恩诺沙星的抗药性和抗药率均明显降低;Rec A抑制剂在一定程度上能抑制SOS应答,起到协同抑菌作用.
关键词： E.coli SOS应答 recA 恩诺沙星 抗药性 RecA 抑制剂
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SOS应答系统及其对细菌耐药性和毒力的调控作用与在治疗细菌感染中的应用
《中国抗生素杂志 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：细菌是最简单的细胞生物,却拥有完整的生化过程和完善而富于变化的基因组。如果说中心法则是保证细菌基因组严谨复制和表达的遗传铁律,那么SOS应答(SOS response,SOSr)系统则是细菌长期进化留下的变异窗口,SOSr增加基因组序列的变异,并调控这一庞大基因组有选择地表达和横向交流,以适应多变的环境。很显然,细菌耐药性与致病力也在SOSr系统调控范围内,耐药性或强致病力菌株的出现大大增加了对致病菌感染治疗的难度。因此,认识细菌耐药性和毒力的关系,研究SOSr的调控机制及其抑制措施,具有进化论意义和重要的医疗价值。
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