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马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价

文献类型： 中文期刊

作者： 杨煜 1 ; 杨晓慧 1 ; 李灿辉 2 ; 郭晓 1 ; 单伟伟 1 ; 马伟清 1 ; 黄三文 3 ; 李广存 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所

2.云南师范大学生命科学学院

3.中国农业科学院蔬菜花卉研究所

关键词： 马铃薯;细菌人工染色体文库;抗病性

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2015 年 42 卷 2 期

页码： 361-366

收录情况： CSCD

摘要： 以四倍体马铃薯栽培品种'合作88'培养12 ~ 15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100 ~ 300 kb片段,连接到载体CopyControl~(TM)pCC1BAC~(TM)的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。

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