文献类型： 中文期刊
作者： 吉祥 1 ; 宋志成 1 ; 韦晓玲 1 ; 杨煜 2 ; 隋炯明 1 ; 郭宝太 1 ;
作者机构： 1.青岛农业大学农学院山东省旱作农业技术重点实验室
2.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所
关键词： 马铃薯卷叶病毒;S病毒;重组双CP;多克隆抗体;间接ELISA;DAS-ELISA
期刊名称： 华北农学报
ISSN： 1000-7091
年卷期： 2022 年 004 期
页码： 212-219
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了制备出马铃薯卷叶病毒（PLRV）与S病毒（PVS）重组双CP多克隆抗体并用于PLRV与PVS这2种病毒的间接与DAS-ELISA检测，构建了PLRV与PVS融合双CP基因的原核表达载体pET22b-LRCP/SCP,用超声破碎法代替溶菌酶法裂解重组菌BL21（pET22b-LRCP/SCP）并提取菌体蛋白，用镍离子亲和层析纯化获得了分子质量为51.2 ku的高纯度的重组双CP。用该重组双CP作抗原免疫家兔获得了高效价（1∶128 k）抗血清。纯化的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性标准物特异性结合，与另外4种马铃薯主要病毒（PVX、PVY、PVA与PVM）无交叉反应。间接ELISA反应中，稀释度为1∶3 200的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性物都呈现阳性反应；在DAS-ELISA反应中，稀释度均为1∶100的重组双CP多克隆抗体及其碱性磷酸酶标记物与PLRV或PVS的阳性标准物也分别呈现阳性反应。结果表明，制备的重组双CP抗体既可用于PLRV与PVS这2种病毒的间接ELISA检测，也可用于DAS-ELISA检测。
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