科研产出
一株鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析
《家禽科学 》 2024
摘要：为确认山东省德州市某肉鸭场疑似为鸭多杀性巴氏杆菌感染的病原菌，本试验对于送检病死鸭进行剖检、细菌分离培养、菌落观察、生化试验、PCR鉴定、16Sr RNA基因测序分析以及药敏试验等方法鉴定该病原菌。结果显示：分离得到的病原菌在含有5%胎牛血清的营养琼脂培养基中呈现为圆形、湿润、光滑的灰白色菌落，革兰氏染色为阴性短杆菌，瑞氏染色呈现两极浓染；分离菌株的生化特性可以发酵葡萄糖、蔗糖以及甘露醇，硫化氢、氧化酶等试验阳性；细菌特异性PCR扩增片段与预期条带大小一致；16S rRNA基因序列系统进化树显示与多杀性巴氏杆菌同源性为99%；分离菌株对于新霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢噻肟、林可霉素具有耐药性，对于氟苯尼考、恩诺沙星、多西环素、粘杆菌素B、卡那霉素、大观霉素敏感。本研究结果为鸭源多杀性巴氏杆菌病的防治提供一定参考依据。
关键词： 鸭 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 16S rRNA 耐药性
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番茄颈腐根腐病病原菌鉴定及抗性品种筛选
《山东农业科学 》 2024
摘要：番茄颈腐根腐病是设施番茄冬春生产中最严重的病害之一，严重威胁我国设施番茄的安全生产。近年来番茄颈腐根腐病在我国番茄主产区发生日益严重，培育抗病品种是防治该病最经济有效的方法。本试验采集典型症状的发病植株进行病原菌分离纯化，综合运用形态学观察、分子生物学鉴定和致病性测定方法，确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型（Fusarium oxysporum f. sp.radicis-lycopersici,Forl）。之后利用分离的病原菌通过苗期人工接种鉴定结合抗性基因分子标记方法，对32个番茄商品种进行抗颈腐根腐病鉴定分析，结果显示有18个表现抗病，与分子标记Frl-ZL的鉴定结果一致，可用于番茄抗颈腐根腐病育种或生产。
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XRN4/EIN5调控拟南芥对盐胁迫和ABA的耐受性
《山东农业科学 》 2024
摘要：XRN4/EIN5是植物的5′-3′核酸外切酶,主要参与细胞质中RNA的降解,同时也是乙烯信号通路的核心基因,在植物的生长发育和乙烯信号转导中起着重要作用.为探究该基因在植物抗逆性方面的作用,以XRN4/EIN5 T-DNA插入突变体ein5-6为材料,设计不同浓度NaCl(0、50、100、150、200 mmol/L)和ABA(0、0.10、0.25、0.50、1.00、1.50μmol/L)处理,基于拟南芥种子发芽率、子叶绿化率、叶片数、叶片面积进行统计分析,结果发现,当盐浓度低于50 mmol/L时,ein5-6的种子发芽率、子叶绿化率、叶片数和叶片面积比野生型Col-0高;当盐浓度达到100 mmol/L时,ein5-6的种子发芽率和子叶绿化率在发育前期比Col-0高,60 h和96 h之后比Col-0低,而二者的叶片数和叶片面积没有差异;当盐浓度达到150 mmol/L及以上时,ein5-6的种子发芽率、子叶绿化率、叶片数和叶片面积比Col-0低.另外,ein5-6对ABA与盐胁迫响应的趋势一致,ABA浓度较低时ein5-6的子叶绿化率高于Col-0,但随着处理时间的延长和ABA浓度的增加,其子叶绿化率越来越低,最终明显低于Col-0.表明与野生型相比,ein5-6对盐胁迫和ABA处理更敏感,推测XRN4/EIN5参与了盐胁迫和ABA响应的调节.
关键词： XRN4/EIN5 盐胁迫 ABA 拟南芥 耐受性
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棉花杂交种鲁杂1178的选育及栽培技术要点
《中国棉花 》 2023
摘要：鲁杂1178属于转基因中熟杂交棉,生育期114 d;单株结铃24.3个,铃重6.5 g,霜前衣分43.8%;2019―2020年山东省中熟杂交棉花品种区域试验中,鲁杂1178纤维品质表现为上半部平均长度30.3 mm,断裂比强度31.2 Cn·tex-1,马克隆值5.1;高抗枯萎病,耐黄萎病,高抗棉铃虫.2021年山东省中熟杂交棉花品种生产试验中,鲁杂1178的666.7 m2 籽棉、霜前籽棉、皮棉、霜前皮棉产量分别比对照鲁棉研28号增产7.5%、7.8%、8.5%和8.8%.对鲁杂1178的选育过程、农艺性状、产量表现、适宜种植区域及栽培技术要点进行了详细介绍.
关键词： 杂交棉 鲁杂1178 品种选育 栽培技术 产量 纤维品质 抗病性 抗虫性
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山东省冬小麦田猪殃殃抗药性水平及ASL靶标抗性机理分析
《植物保护学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为明确山东省冬小麦田猪殃殃Galium aparine对常规除草剂氯氟吡氧乙酸、苯磺隆及双氟磺草胺的抗性水平和抗性种群的乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)靶标抗性机理,在温室内采用整株生物测定法测定21个猪殃殃种群对氯氟吡氧乙酸、苯磺隆和双氟磺草胺的抗性水平,同时根据猪殃殃ALS基因序列设计引物,提取猪殃殃高抗种群单株基因组DNA进行测序,并与拟南芥Arabidopsis thaliana敏感型ALS基因进行比对,查找突变位点分析其抗性机理.结果表明,21个猪殃殃种群对氯氟吡氧乙酸均敏感,尚未产生抗性;90.48%的猪殃殃种群已对苯磺隆产生了抗性,其中低抗、中抗和高抗种群分别占总种群数的23.81%、23.81%和42.86%,相对抗性指数最高为1 134.82;71.43%的猪殃殃种群已对双氟磺草胺产生了抗性,其中低抗、中抗和高抗种群分别占总种群数的19.05%、9.52%和38.10%,相对抗性指数最高为87.05.高抗苯磺隆种群XZ-1和LW均发生了 ALS基因第197位氨基酸功能位点的突变,其中XZ-1种群发生了 CCC(脯氨酸)到TCC(丝氨酸)的突变,而LW种群发生了 CCC(脯氨酸)到ACC(苏氨酸)的突变;高抗双氟磺草胺种群XZ-1也发生了 CCC(脯氨酸)到TCC(丝氨酸)的突变,表明第197位氨基酸可能是猪殃殃对苯磺隆和双氟磺草胺发生抗性的主要突变位点.
关键词： 氯氟吡氧乙酸 双氟磺草胺 苯磺隆 猪殃殃 抗性 乙酰乳酸合成酶
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转基因玉米双抗12-5-21的抗虫性及对草甘膦的耐受性
《生物安全学报 》 2021 CSCD
摘要：【目的】评价转cry1Ab/cry2Aj和G10evo-epsps基因玉米双抗12-5的杂交后代双抗12-5-21对亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫的抗性及对目标除草剂草甘膦的耐受性。【方法】分别在6叶期和花丝期、6叶期、花丝期对亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫进行田间人工接虫;自然条件下,收获期剖秆调查双抗12-5-21对鳞翅目害虫的抗性;在玉米5叶期分别喷施推荐剂量中剂量及2、4、6倍中剂量草甘膦,药后1、2、4周调查玉米受害情况。【结果】6叶期及花丝期,双抗12-5-21受亚洲玉米螟为害的虫害平均级值分别为1.12和1.07;6叶期,双抗12-5-21受黏虫为害的虫害平均级值为1.32;花丝期,双抗12-5-21受棉铃虫为害的虫害平均级值为0.02。双抗12-5-21对亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫抗性均达高抗水平。收获期剖秆结果显示,双抗12-5-21蛀孔数、活虫数及受害株率均显著低于对照玉米,对鳞翅目害虫控制效果达90%以上。喷施中剂量草甘膦,双抗12-5-21完全无受害症状;喷施2、4倍中剂量草甘膦后1周,双抗12-5-21表现轻微药害,2周后玉米完全无受害症状;双抗12-5-21喷施6倍中剂量的草甘膦后2周,受害率由1周的36.00%降为8.00%,新生叶片正常,4周后双抗12-5-21生长完全恢复正常,株高未受影响。【结论】转基因玉米双抗12-5-21田间对亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫的抗性均达高抗;双抗12-5-21能够耐受4倍中剂量草甘膦。
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山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析
《中国畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中blaTEM基因携带率为100%,其中全部为blaTEM-1基因,blaCTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为blaCTX-M-15基因,没有检测到blaSHV、blaOXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac（6’）-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。
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山东地区鸡源致病性大肠杆菌的相关基因检测及药敏试验
《家禽科学 》 2019
摘要：为了解近年山东省禽源大肠杆菌的毒力因子及耐药情况,分析潜在的公共安全问题,特将本实验室保存的大肠杆菌标准株与送检的发病(死)鸡中分离的菌株同时进行毒力基因的PCR检测及药敏试验.结果显示:16种常见抗生素中,青霉素G和万古霉素对20株大肠杆菌均无抑制作用,而抑菌效果较好的抗生素主要有阿米卡星、庆大霉素等;其中两株大肠杆菌分离株对上述16种抗生素均不敏感,17株大肠杆菌对超过5种以上抗生素耐药;13株含有5种以上毒力因子基因,占比65%;4株同时含有7种毒力因子基因,占比20%;仅1株不含被检毒力基因.上述结果表明,大肠杆菌耐药形势异常严峻,并且部分菌株具有较强的致病力.本次试验结果同样对保障公共健康、防止耐药菌株通过食物链进入人体造成危害具有借鉴意义.
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