科研产出
金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。
关键词: 金黄色葡萄球菌 乳腺炎 粘附素 纤连蛋白连接蛋白A
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奶牛乳房炎的生物学防治
《动物医学进展 》 2007
摘要:奶牛乳房炎是对奶牛业危害最严重的疾病之一。目前治疗奶牛乳房炎仍以抗生素为主,生物学方法防治奶牛乳房炎,无残留、副作用小、不影响牛乳品质,愈来愈受到人们的关注,已经成为研究的热点。在国外,已经有生物制品和生物技术应用于临床,并取得了很大的成功。用于奶牛乳房炎的生物学防治方法有很多,文章重点对国内外在奶牛乳房炎生物学防治方面已经取得的成就进行总结,包括细菌素、抗菌肽、乳铁蛋白、乳铁素、生物性制剂、基因疗法和生物疗法等。
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奶牛乳腺炎诊断方法研究进展
《中国牛业科学 》 2007
摘要:奶牛乳腺炎的诊断方法有很多,临床乳腺炎可根据临床症状进行诊断,用于隐性乳腺炎的诊断方法有乳汁细胞学检查、乳汁的细菌培养、电导率测定、pH值的检查、乳清电泳诊断法、酶检测法、PCR检测方法、被毛微量元素检验法以及其它衍生方法。本文对奶牛乳房炎诊断研究进展作了系统的介绍。
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MHC基因与奶牛乳房炎相关性研究进展
《中国奶牛 》 2007
摘要:奶牛乳房炎是一种严重危害奶牛生产的疾病,它的发生与管理、环境、遗传等多种因素有关。组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)基因在动物机体的免疫系统中占有重要地位,并且存在极其丰富的多态性。MHC的部分等位基因型与奶牛乳房炎存在密切的相关性。本文对奶牛MHC基因多态性与乳房炎相关性进行了综述。
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多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用
《畜牧兽医学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:参照GenBank发表的序列,在金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌16S rRNA与23S rRNA之间的区域设计了3对引物,参照念珠菌和隐球菌的18S rRNA的序列设计1对引物,建立了检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌4种乳腺炎主要致病菌的多重PCR方法。参照Skladny的方法制备模拟了细菌感染临床标本。结果表明:本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性,多重PCR方法检测乳样中的金黄色葡萄球菌的细菌最小浓度为104CFU/mL,检测无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌的细菌最小浓度分别为102CFU/mL、103CFU/mL和103CFU/mL。通过对采自临床型乳腺炎(46个)和隐性乳腺炎(167个)动物共计213个乳样分别用传统细菌学培养法和多重PCR方法进行检测,多重PCR对金黄色葡萄球菌和酵母真菌的检测具有更高的检出率(P<0.01),但该方法对无乳链球菌和停乳链球菌的检出率与培养法差异不显著(P>0.05)。
关键词: 多重PCR 乳腺炎 金黄色葡萄球菌 无乳链球菌 停乳链球菌 酵母真菌
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奶牛隐性乳腺炎病原菌的分离鉴定和体细胞数及酶的相关性研究
《家畜生态学报 》 2006
摘要:对330个乳样分别用加州乳腺炎检验(California Mastitis Test,CMT),体细胞计数(Somatic Cell Count,SCC)和细菌的分离培养(Isolation of bacteria)法进行隐性乳腺炎的检测,结果表明3种方法检测的结果差异不显著(P>0.05);对检测患有隐性乳腺炎的241乳区进行了细菌的分离培养,结果表明引起隐性乳腺炎的最主要致病菌为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌、其它细菌的检出率差异根显著(P<0.05)。对分离出优势细菌的部分乳样进行了SCC与LDH,NAGase,ALP和ACP几种酶的测定和相关性分析,结果表明:LDH与SCC有显著的相关性(r=0.7936),并且LDH与NA-Gase,ALP,ACP都有明显的相关性;NAGase与ACP,LDH有明显的相关性,但与ALP没有相关性;ALP只与ACP和LDH有显著的相关性外,与SCC,NAGase没有相关性;ACP与SCC,LDH,NAGase,ALP都有极显著的相关性。
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奶牛乳腺炎的细菌学研究
《家畜生态学报 》 2005
摘要:在对山东7个地区14个奶牛场临床型和隐性乳腺炎调查的基础上采集234头临床乳腺炎病牛乳样、241个隐性乳腺炎乳样并分别做了细菌学检查,结果表明:泌乳期临床型乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、酵母菌和棒状杆菌为主;干奶期临床型乳腺炎病原菌以大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和酵母菌为主;隐性乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌为主;厌氧菌在隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎和干奶期乳腺炎乳样的捡出率分别为 5.82%,4.17%,10.16%;隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎细菌的共感染率较高,与泌乳期乳腺炎病原菌的差异极显著(P<0.01),隐性乳腺炎与干奶期乳腺炎病原菌共感染率差异不显著(P >0.05)。
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