科研产出
3株鸽源新城疫病毒的分子特征及对鸽的致病性
《中国兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：2011-2013年在新城疫流行病学调查中分离到3株鸽源新城疫病毒(SDS,SD01和SD02),为了进一步了解其生物学特性和遗传进化规律,对3株病毒进行了测序和生物活性分析,并对分离株SDS对鸽的致病性进行了评价.结果表明,毒株SDS基因组全长为15 192 bp,基因排列方式为3'-NP-P-M-F-HN-L-5',3个分离株F蛋白裂解位点氨基酸序列均为12RRQKRF117,具有典型的新城疫强毒的分子特征.系统进化分析表明这3个毒株与基因Ⅵ型NDV毒株聚于一簇,属于ClassⅡ系Ⅵb基因型.3个分离株F蛋白的融合肽和七肽重复区,HN蛋白的抗原中和表位存在多处突变,与单克隆抗体1E5、2F10的反应性也发生改变,表明3个分离株与疫苗株LaSota有明显的抗原差异.SDS攻毒试验结果显示,试验鸽自攻毒后5d出现明显的临床症状,滴鼻组和肌肉注射组的死亡率分别为60%和70%;病死鸽剖检可见脑膜充血出血,腺胃乳头、腺胃肌胃交界及肠道出血,肝脏肿大,脾有淤血斑.滴鼻组在攻毒后5~14 d于喉头和泄殖腔检出排毒,而肌肉注射组在攻毒后3~14 d于喉头和泄殖腔有排毒.
关键词： 鸽源新城疫病毒 鸽Ⅰ型副黏病毒 F基因 HN基因 Ⅵb基因型 致病性
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山东地区鸡源致病性大肠杆菌的相关基因检测及药敏试验
《家禽科学 》 2019
摘要：为了解近年山东省禽源大肠杆菌的毒力因子及耐药情况,分析潜在的公共安全问题,特将本实验室保存的大肠杆菌标准株与送检的发病(死)鸡中分离的菌株同时进行毒力基因的PCR检测及药敏试验.结果显示:16种常见抗生素中,青霉素G和万古霉素对20株大肠杆菌均无抑制作用,而抑菌效果较好的抗生素主要有阿米卡星、庆大霉素等;其中两株大肠杆菌分离株对上述16种抗生素均不敏感,17株大肠杆菌对超过5种以上抗生素耐药;13株含有5种以上毒力因子基因,占比65%;4株同时含有7种毒力因子基因,占比20%;仅1株不含被检毒力基因.上述结果表明,大肠杆菌耐药形势异常严峻,并且部分菌株具有较强的致病力.本次试验结果同样对保障公共健康、防止耐药菌株通过食物链进入人体造成危害具有借鉴意义.
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一株肉鸡呼肠孤病毒变异株的分离鉴定
《畜牧兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：旨在研究肉鸡呼肠孤病毒分离株致病与基因组变异情况.2017年从山东潍坊地区跗关节肿胀、出血严重商品肉鸡中收集病料,进行病毒分离,通过RT-PCR检测、电镜观察对病毒进行鉴定;将分离到的病毒回归商品肉鸡;设计18对引物对分离株全基因组扩增测序,并进行了遗传进化分析;将分离毒株与经典毒株S1133进行血清交叉中和试验.结果表明分离到一株禽呼肠孤病毒(命名为WF17),回归商品肉鸡能完全复制出临床症状,并能从试验鸡中重新分离到该病毒.该分离株基因组完全符合禽呼肠孤病毒基因组结构特点,主要抗原σC蛋白基因与台湾918株最接近,相似性为92.7%,与S1133株的相似性只有55.9%.WF17株与S1133株的抗原相关指数(R值)只有0.19.目前以S1133株为主的商品化疫苗无法对禽呼肠孤病毒变异株产生有效保护.
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猪流行性腹泻病毒JX16株的分离鉴定及体外传代对其毒力的影响
《中国畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：2010年中国新出现了以新生仔猪高发病率、高死亡率为主要特征的变异株。为了明确山东地区猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株特征,本试验利用Vero细胞对莒县某猪场的腹泻病料进行了病毒分离和体外传代培养。通过光学显微镜和细胞超薄切片观察、RT-PCR检测、间接免疫荧光试验、S基因序列进化分析、滴度测定和致病力试验进行病毒序列及特征分析,并探究接毒后细胞脱落时间的变化。光学显微镜观察发现,该病毒感染Vero细胞后能引起典型的合胞体病变;细胞超薄切片观察发现,病毒粒子多呈致密核芯,能引起宿主细胞线粒体肿胀,溶解;RT-PCR检测和间接免疫荧光试验结果证实其为PEDV,最终通过测序证实该毒株为变异毒株。体外传代培养至100代过程中,随着病毒代次升高,其对细胞适应性不断增强。接毒后细胞脱落时间由48 h逐渐缩短至17 h,病毒滴度由6代时的10~(5.3)TCID_(50)/mL逐渐升高至100代的10~(7.5)TCID_(50)/mL。致病力试验结果显示,病毒毒力随代次升高逐渐下降,40代时对仔猪已无致病力。本试验结果为PEDV突变株致病基因的确定及疫苗的研发奠定了基础。
关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 传代培养 致病力
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孵化后期死胚粪肠球菌感染率调查及病原部分特性测定
《中国家禽 》 2018 北大核心
摘要：从山东省5个规模化种鸡场收集360个孵化后期死胚进行粪肠球菌分离培养,并通过生化试验、粪肠球菌种特异性基因PCR扩增和16 S r RNA基因序列鉴定,共获得115株粪肠球菌。药敏试验结果:分离株对四环素、红霉素、诺氟沙星、环丙沙星的耐药率很高,分别是98%、90%、80%、76%,对头孢噻肟、氯霉素、青霉素G、庆大霉素、氨苄西林、万古霉素的耐药率低,分别是10%、8%、8%、4%、4%、4%,对链霉素和呋喃妥因的耐药率为0。鸡源粪肠球菌的5种毒力因子检出率分别为efa A(26/35)、asal(24/35)、gel E(22/35)、Ace(8/35)、Esp(7/35)。
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一株猪流感病毒的遗传进化分析及其致病力研究
《中国预防兽医学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为研究猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)A/swine/Dezhou/37/2015(H1N1)株的遗传进化和致病力,本研究对该分离株的8个基因节段进行了遗传进化分析,并接种小鼠观察临床表现及检测其肺脏的病理变化情况。结果显示:分离株HA基因的裂解位点为PSIQSR↓G,无多个连续碱性氨基酸插入,为低致病性SIV;HA、M、NA节段处于欧洲类禽H1N1分支;NP、PA、PB1、PB2节段处于2009甲型H1N1分支;NS节段处于北美三源重排分支;对小鼠致病力研究显示该毒株可感染小鼠并引起其肺脏组织病理学变化,但对小鼠无致死性。以上结果表明该分离株为一株低致病性的新型三源重排SIV。本研究为山东地区SIV的流行特点及变异情况提供了实验依据。
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花生叶腐病菌分泌的细胞壁降解酶活性测定及致病性分析
《植物生理学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了明确花生叶腐病菌分泌的细胞壁降解酶种类和致病作用以及花生品种木聚糖酶抑制剂基因与抗叶腐病的关系,本研究进行了花生品种对叶腐病的抗性鉴定,测定了离体条件下和活体内病菌分泌的细胞壁降解酶活性与变化,扩增了3种花生木聚糖酶抑制剂基因。结果表明:花生叶腐病菌能产生果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶、漆酶等细胞壁降解酶,无论活体外培养还是接种植株体内都表现为果胶酶活性最高,其次是漆酶和木聚糖酶,活性最弱的是纤维素酶;果胶酶中多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)活性强,而果胶甲基反式消除酶(PMTE)的活性较弱,甚至在离体条件下没有测到活性,说明病菌产生的几种细胞壁降解酶活性有较大差异;其次,叶腐病菌分泌的细胞壁降解酶在花生不同抗性品种中的活性和变化也不同,感病品种中测得的细胞壁降解酶活性一般都比抗病品种高,随接种时间增长的活性变化曲线也比抗病品种增加的速度快。另外,在花生品种中检测到3种木聚糖酶抑制剂基因XIP、TAXI和TLXI,但品种间分布不均衡,其中TAXI基因与花生叶腐病抗性关系密切。
关键词： 花生叶腐病菌 细胞壁降解酶 致病性 木聚糖酶抑制剂基因
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Ⅶ型NDV对鸽子和鸡的致病性差异研究
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究NDV强毒(基因Ⅶ型)对鸽子和SPF鸡的致病性差异。【方法】将试验鸽和SPF鸡随机分为4组,每组10只,给其中2组分别滴鼻和肌肉注射鸭源NDV分离株Duck/China/SD03/2009,攻毒剂量为106.2EID50,设空白对照组和同居感染组。攻毒后观察临床症状和剖检变化,并对攻毒后3,5,7,14d动物的血清抗体,喉头、泄殖腔的排毒情况及内脏器官的病毒滴度、抗体效价进行检测。【结果】鸽子感染NDV强毒后呼吸道症状不明显,但脑膜严重出血,腺胃和肠道轻度出血,死亡率为10%~30%;而同期SPF鸡攻毒后表现为急性感染症状,死亡率为100%。鸽子在攻毒后第7天均检出排毒,至14d时均未检出。攻毒后5~14d在所检鸽体内脏器官中均检出病毒,以脑、肺、肠中的病毒含量较高。病毒也可诱导鸽子产生较高水平的血清抗体,至14d时血清抗体HI滴度为512~2 048。【结论】基因Ⅶ型新城疫强毒株Duck/China/SD03/2009对鸽子和鸡的致病性差异明显,与SPF鸡相比,鸽子感染后呼吸道和消化道症状较轻,死亡率也较低,表明基因Ⅶ型NDV强毒株能感染鸽子,但对鸽子的致病性较低。
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野生水禽源ClassⅠ新城疫病毒对SPF鸡的致病性研究
《畜牧兽医学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了科学地了解新城疫病毒(NDV)的遗传进化规律,本研究对从鹭科候鸟分离的NDV毒株SD22/13的生物学特性和致病特性进行了研究。通过致病性指数测定和交叉血凝抑制试验测定分离株SD22/13的毒力及与LaSota疫苗株、基因Ⅶ型NDV毒株的抗原相关性,同时设计引物对F基因进行克隆测序和遗传进化分析,并对其在SPF鸡上的致病性进行评价。生物学特性和遗传进化分析显示SD22/13属于ClassⅠ分支基因3型,与LaSota疫苗株的抗原相关性为56.1%,与基因Ⅶ型强毒株的抗原相关性低于50%。致病性试验结果表明该毒株可在鸡体内较好复制,并刺激机体产生较高水平血清抗体,鸡的免疫器官和肾虽均有轻微的病理损伤,但无发病死亡,对试验鸡致病性较低;SD22/13感染后30d,再以基因Ⅶ型强毒株攻毒,在10d观察期内SD22/13感染组鸡均健康,无发病死亡,而对照组鸡至第5天时全部死亡。本研究结果表明分离株SD22/13在生物学特性、抗原性和对SPF鸡致病性方面与基因Ⅶ型NDV存在明显差异;虽然SD22/13与基因Ⅶ强毒株抗原相关性较低,不能阻止其排毒,却能完全保护鸡抵抗强毒株的攻击。
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甜樱桃流胶病原菌的分子鉴定和致病性检测
《植物病理学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为明确甜樱桃流胶病的病原菌,采用普通细菌学方法从15个病样中分离获得10个代表性菌株,对病原菌的形态学特征、生理生化特性以及致病性进行了研究。利用PCR对菌株的16S-23S rDNA转录间隔区(ITS)序列进行扩增,扩增产物克隆测序,结果显示该菌株属于丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)。用Meg Align构建系统发育树,结果显示该菌株与丁香假单胞菌丁香致病变种(P.syringae pv.syringae)亲缘关系最近,两者最先聚在一起。分离菌株中均可检测到syr B基因。研究结果表明P.syringae pv.syringae为甜樱桃流胶病的病原菌。
关键词： 甜樱桃流胶病 丁香假单胞菌丁香致病变种 16S-23S rDNA转录间隔区序列 致病性 syrB基因
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