科研产出
转基因玉米转化体特异性寡核苷酸芯片检测方法的研制
《作物学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%。在植物基因组与外源基因的连接区域,利用PrimerPremier5.0和Oligo6.0软件分别设计和筛选7种转基因玉米40merOligo转化体特异性探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片,并对芯片检测的特异性、重复性及检测灵敏度进行检验。证明所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。与PCR检测方法相比,基因芯片检测法灵敏度高、特异性强,可有效检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高检测的准确率和效率。
关键词： 转基因玉米 转化体特异性 寡核苷酸芯片 Oligo探针 灵敏度
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转基因玉米多重PCR-基因芯片联用的检测方法
《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据7种转基因玉米(Zea mays)Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构分别设计转化体特异性引物,并对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%,在此基础上以玉米内参照基因(ZSSIIb)作对照,对Bt11、Mon810、TC1507和GA21、NK603、Bt176分别作了2对四重PCR反应。根据插入外源基因与插入位点植物基因组DNA的特异结构,分别设计和筛选了7种转基因玉米转化体特异性Oligo探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片。结果表明,所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。利用基因芯片检测方法结合多重PCR,建立并优化了1套三重PCR反应体系和两套四重PCR反应体系,可在1张芯片上同时有效地检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高了检测的准确率和效率。
关键词： 转基因玉米 转化体特异性检测 多重PCR Oligo探针
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转基因玉米外源基因通过花粉漂移的频率和距离
《生态学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：基因漂移是转基因生物可能引起生态环境安全性问题的主要风险之一,选用美国孟山都公司的转基因抗除草剂玉米GA21进行了外源基因向周边环境遗传漂移的距离和频率的研究,结果表明:转基因玉米的外源基因可以向周边玉米品种进行漂移,其最大漂移频率为45.10%,150m处仍能检测到外源基因的漂移,防止转基因玉米基因向外扩散的最佳途径为设置隔离带,隔离距离以200m以上为好。
关键词： 转基因玉米 基因漂移 抗除草剂基因EPSPS 定性PCR
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用复合PCR方法检测6种转基因玉米中外源DNA的特异性
《农业生物技术学报 》 2005 CSCD
摘要：利用本实验室研制的植物DNA提取试剂盒,从玉米(Zeamays)种子中提取符合PCR检测要求的DNA。根据不同转基因玉米中重组DNA的结构,分别设计引物,可对Bt11、Event176、T25、MON810、GA21和NK603等6种转基因玉米进行特异性PCR检测。在此基础上建立了针对6种转基因玉米的特异性DNA片段和玉米内参照基因(zein)的复合PCR检测方法,能同时对7对引物进行扩增,通过产物的长度差异对不同的转基因玉米进行辨别,实现了在同一个PCR反应管中同时对6种不同转基因玉米的特异性检测。
