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转基因玉米转化体特异性寡核苷酸芯片检测方法的研制

文献类型: 中文期刊

作者: 路兴波 1 ; 武海斌 1 ; 王敏 2 ; 李宝笃 2 ; 杨崇良 1 ; 孙红炜 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院植物保护研究所

2.青岛农业大学植物保护学院

关键词: 转基因玉米;转化体特异性;寡核苷酸芯片;Oligo探针;灵敏度

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2009 年 35 卷 08 期

页码: 1432-1438

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%。在植物基因组与外源基因的连接区域,利用PrimerPremier5.0和Oligo6.0软件分别设计和筛选7种转基因玉米40merOligo转化体特异性探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片,并对芯片检测的特异性、重复性及检测灵敏度进行检验。证明所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。与PCR检测方法相比,基因芯片检测法灵敏度高、特异性强,可有效检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高检测的准确率和效率。

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