科研产出
噁唑酰草胺和氰氟草酯在水稻中的残留及膳食风险评估
《农药科学与管理 》 2021
摘要：明确噁唑酰草胺和氰氟草酯在水稻中的残留情况及对人体的膳食摄入风险。建立了噁唑酰草胺和氰氟草酯及其代谢物在糙米、稻壳和秸秆中的残留分析方法。在0.02～0.5mg/kg添加水平下,噁唑酰草胺、氰氟草酯及其代谢物在水稻基质中的平均回收率为83%～112%,相对标准偏差为1%～16%。噁唑酰草胺、氰氟草酯及其代谢物在糙米、稻壳和秸秆中的定量限分别为0.02mg/kg、0.05mg/kg和0.05mg/kg。试验结果表明:噁唑酰草胺、氰氟草酯在水稻中残留量均低于我国制定的限量标准。膳食风险评估结果表明:噁唑酰草胺、氰氟草酯在水稻中残留量在可接受范围,不会对我国人体健康产生影响。
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山东省水稻品种(系)的遗传多样性分析
《作物杂志 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：利用全自动DNA分析仪荧光SSR-PCR技术和农业行业标准《水稻品种鉴定技术规程SSR标记法（NY/T1433-2014）》中公布的48对SSR引物,对山东省育成和审定的48个水稻品种（系）进行遗传多样性分析。结果表明,有40对SSR引物在48个品种（系）间表现多态性,多态率为83.3%。检测到等位基因133个,每对引物的等位基因数变幅为1～7个,平均3.32个。SSR引物的多态性信息量（PIC）变化范围为0.0384～0.7333,平均值0.2560。标记指数（MI）的变化范围在0.08～5.13,平均值0.93。48个水稻品种（系）间的遗传相似系数（GSC）在0.6390～0.9859之间,平均值0.7800,89.6%品种（系）的GSC在0.7189～0.9859之间,亲缘关系较近;以GSC为基础,按UPGMA方法在阈值0.75处将48个品种（系）划分为4大类群。由此可见,山东省育成和审定的水稻品种（系）遗传多样性不够丰富,品种（系）间的亲缘关系较近,需要进一步拓宽亲本选择范围,扩大遗传背景。
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利用单片段代换系研究水稻抽穗期等位基因变异
《华北农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了研究水稻单片段代换系（Single segment substitution line, SSSL）与受体亲本HJX74（Huajingxian 74）抽穗期差异的原因,以HJX74和5个具有抽穗期差异显著性的SSSLs WY18（W06-15-18-3-11）、WY24（W08-16-3-2）、WY26（W11-15-7-1-1）、WY60（W15-3-1-38）、WY61（W17-10-5-5-35-9-2）为试验材料,对其代换片段上已知的抽穗期等位基因进行克隆,获取其CDS序列,用多种生物信息学方法进行序列比对,包括CDS序列、氨基酸序列,比较其氨基酸理化性质的异同及表达的差异。田间抽穗期表型性状调查结果表明,WY18、WY60、WY61相对于HJX74表现为晚抽穗,WY24、WY26表现为早抽穗。与HJX74相比,WY18代换片段上抽穗期等位基因DTH8存在4个SNP的差异、WY26中OsDof12存在7个SNP的差异、WY60 DTH8存在6个SNP的差异,但以上SNP的突变均未改变其氨基酸序列的亲水性及理化性质,表明这些抽穗期等位基因的突变可能并不是引起其抽穗期变化的原因。进一步通过qRT-PCR技术分析发现,WY18中DTH8、WY26中OsDof12的表达水平整体高于HJX74中的相应基因,表明该等位基因上游调节区域对其基因的表达进行了调控,可能是导致其抽穗期变异的原因。WY24中se14、WY61中Hd1存在明显的序列片段缺失,造成se14和Hd1等位基因功能缺失,可能是WY24、WY61抽穗期变异的主要原因。
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高效液相色谱-串联质谱检测水稻中氯吡嘧磺隆残留量
《农药科学与管理 》 2020
摘要：建立了高效液相色谱-串联质谱检测糙米、稻壳和秸秆中氯吡嘧磺隆残留的分析方法。样品经乙腈和水提取,C18吸附剂净化,多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明,在0. 01～2mg/L范围内,氯吡嘧磺隆的质量浓度与对应的峰面积间呈良好的线性关系,其相关系数为0. 999 7。在0. 01～0. 5mg/kg添加水平下,氯吡嘧磺隆在糙米中的平均回收率为95%～98%,相对标准偏差(RSD)为2%～4%。在0. 05～5mg/kg添加水平下,氯吡嘧磺隆在稻壳和秸秆中的平均回收率为78%～87%,相对标准偏差(RSD)为1%～5%。氯吡嘧磺隆在糙米中的定量限(LOQ)为0. 01mg/kg,在稻壳和秸秆中的定量限(LOQ)为0. 05mg/kg。该方法简便、快速、准确。
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超高效液相色谱质谱联用法检测水稻中双草醚的残留量
《山东化工 》 2020
摘要：建立了基于UPLC-MS/MS的测定水稻中双草醚残留量的方法.用乙腈和水的混合物提取样品,进行纯化和检测.采用外部标准校准曲线定量分析.结果表明,双草醚在糙米、稻壳和稻秆中平均添加回收率分别为95%~101%、97%~101%和99%~113%,相对标准偏差分别为6%~8%、1%~4%和2%~3%.双草醚在糙米中的最低检出质量分数为0. 02 mg/kg.该方法快速简便,准确可靠.
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分子标记辅助选择培育低直链淀粉含量抗除草剂水稻
《华北农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了提高水稻的食味品质和生产实践,培育了低直链淀粉含量和抗咪唑啉酮类除草剂2种性状兼顾的水稻新品系.利用带有低直链淀粉含量的南粳9108作为软米基因的供体,与显性核不育分离群体中不育单株进行杂交,并用南粳9108作为轮回亲本回交2次得到BC2 F1群体,利用Wx-mq基因存在单核苷酸变异,对BC2 F1群体的单株进行四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)扩增,依据其PCR产物带型可以准确区分Wx-mq纯合基因型、Wx-mq杂合基因型、非Wx-mq纯合基因型,筛选出农艺性状优良带有低直链淀粉含量的不育和可育单株;然后利用带有抗咪唑乙盐酸基因(Acetolactate Synthase,ALS)的金粳818作为抗除草剂基因的供体,与筛选出的带有低直链淀粉含量的不育单株进行杂交得到F1群体,利用编码区ALS基因的碱基变异,进行等位基因特异PCR(AS-PCR)扩增,筛选出抗除草剂纯合基因型、感除草剂纯合基因型、抗除草剂杂合基因型.经ARMS-PCR鉴定结果表明,BC2 F1不育群体中检测得到172株单株带型与南粳9108一致,含有糯性基因,性状为糯性;160株单株不含糯性基因;468株单株带型为双亲的杂合基因型.通过AS-PCR进行除草剂抗性鉴定,结果表明,在F1群体1200个单株中,检测得到868个抗除草剂单株和332个感除草剂单株,其中纯合基因型624个,杂合基因型576个.经过逐代低直链淀粉含量和抗除草剂分子标记的选择,在F5选育出同时具有除草剂抗性的低直链淀粉含量的水稻新品系6个.
关键词： 水稻 咪唑乙烟酸 四引物扩增受阻突变体系PCR Wx-mq 分子标记 低直链淀粉
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利用CRISPR/Cas9技术编辑DTH8基因改良水稻99-25的抽穗期
《华北农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：CRISPR/Cas9基因编辑技术已经成为水稻育种的重要手段。为培育早熟、丰产、优质的种质资源,以农艺性状优良、迟熟粳稻品种香糯99-25为试验材料,构建了CRISPR/Cas9双靶点表达载体对抽穗期基因DTH8进行编辑,采用农杆菌介导法将构建好的表达载体转化农杆菌EHA105。用携带重组质粒的农杆菌菌液侵染水稻愈伤组织,成功获得了30株T0转基因苗。对T0植株利用潮霉素特异引物进行分子检测,其中阳性植株29株,阳性率高达96.7%。设计特异性引物对29株阳性苗的靶位点上下游600 bp进行PCR扩增测序,结果表明,7株转基因阳性苗在第2个靶点附近发生了碱基替换或插入突变。对这7株突变株系的抽穗期进行调查,发现DTH8-2、DTH8-5、DTH8-9、DTH8-10、DTH8-17、DTH8-21的抽穗期提前。利用实时荧光定量PCR检测发现DTH8-2、DTH8-9、DTH8-17与香糯99-25相比DTH8基因表达显著降低。成功利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对香糯99-25的DTH8基因进行了编辑,获得了抽穗期提前的DTH8突变体材料,为培育早熟、丰产、优质的水稻品种提供了种质资源。
关键词： 水稻 抽穗期 基因编辑 DTH8 CRSPR/Cas9
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基于焦磷酸测序技术建立基因编辑水稻检测方法
《生物技术进展 》 2020
摘要：基因编辑技术发展迅速,但对应的检测方法较少.为寻找创建基因编辑作物适用的检测方法,以PL3基因编辑水稻编辑位点为靶标,有效设计了焦磷酸测序的扩增引物及测序引物,并进行有效性检测,分别利用Sequence to Analyze等程序以及SNP和AQ两种模式完成了对PL3基因的定性和定量检测试验,建立了PL3基因编辑水稻编辑位点焦磷酸测序检测方法.结果表明,基于焦磷酸测序技术可以通过检测编辑位点从而将基因编辑型水稻与野生型水稻进行区分.与常规的转基因检测方法相比,该检测方法具有较好的准确性、高效性及高灵敏度等优点,在基因编辑型水稻编辑位点定性和定量检测分析方面具有很好的应用前景.
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表型组学在水稻研究中的应用
《中国水稻科学 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：水稻作为重要粮食作物,其重要农艺性状的功能基因组研究是植物生物学研究的热点。植物基因型、表型和环境三者构成了遗传学研究的铁三角。随着高通量测序技术的快速发展,基因型的研究更加简单快速。然而表型研究严重滞后于基因型研究。目前传统的表型信息的获取存在所需劳动量巨大、成本高,所获取表型数据受人工主观因素影响大等诸多难题。高通量表型组学可无损、高通量、精准获取表型信息,对解决以上难题具有关键作用。本文对表型组学在水稻中的研究应用情况进行整理,为今后水稻基因组学和表型组学等多学科相结合的现代研究手段提供理论支撑。
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