科研产出
氧化应激通过Fas/FasL信号通路调控奶牛子宫内膜细胞凋亡
《畜牧兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：胚胎早期死亡及流产严重影响母牛的繁殖性能，造成极大的经济损失。本研究利用不同浓度双氧水（H2O2）处理子宫内膜细胞6 h,通过流式细胞仪、酶标仪分别进行细胞内活性氧（ROS）水平、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性以及还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG）比值检测，建立子宫内膜细胞氧化应激模型。在此基础上，利用流式细胞仪检测细胞凋亡和生长周期，利用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Fas/FasL信号通路关键基因的mRNA和蛋白表达水平，并利用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）抑制子宫内膜细胞中Fas基因表达，进一步验证Fas/FasL凋亡通路是否参与氧化应激诱导的子宫内膜细胞凋亡。所有试验都重复3次以上。结果发现，利用200μmol·L-1 H2O2处理子宫内膜细胞6 h,细胞内ROS阳性水平急剧增加（P<0.05）,SOD和CAT活性以及GSH与GSSG比值都显著降低（P<0.05）,说明H2O2处理对子宫内膜细胞造成氧化应激损伤。在此处理条件下，生长周期中S期比例显著降低（P<0.05）,凋亡比例显著提高（P<0.05）;Fas/FasL凋亡通路中关键基因Fas、Caspase 8和Caspase 3的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）;培养液中FasL浓度以及Fas、Caspase 8和Caspase 3蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。进一步研究发现，抑制Fas基因表达在一定程度上降低了氧化应激诱导的细胞凋亡比例以及Fas/FasL凋亡通路中关键基因的表达水平。总之，本研究结果表明，氧化应激通过激活Fas/FasL信号通路促进奶牛子宫内膜细胞凋亡，这为解释氧化应激对子宫内膜细胞的不利影响提供了新的见解。
关键词： 氧化应激 Fas/FasL信号通路 细胞凋亡 子宫内膜细胞
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三种农药对人神经母瘤细胞SH-SY5Y的联合毒性机制
《山东农业科学 》 2021
摘要：由于农药残留已成为影响目前农产品质量安全的主要风险因子之一,因此本试验研究了蔬菜中经常检出的毒死蜱、克百威、联苯菊酯单独及联合染毒对体外培养细胞株的毒性,并分别测定了3种农药单独和联合对细胞增殖抑制率、凋亡率、活性氧水平（ROS）和脂质过氧化产物丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）活性等的影响。结果表明,毒死蜱、克百威、联苯菊酯单独染毒时均对细胞增殖产生抑制效果,且具有浓度依赖性;联合处理后均为协同作用。3种农药均可显著改变细胞的氧化还原因子水平,且联合作用组的ROS含量显著高于单独处理组。3种农药均显著降低SOD和GSH活性,提高MDA活性。说明毒死蜱、克百威、联苯菊酯单独及联合染毒都具有细胞毒性,氧化应激可能是其产生细胞毒性的机制之一。
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甘油二酯对2型糖尿病肾病大鼠肾脏保护机制
《营养学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：目的探讨甘油二酯(DAG)对糖尿病肾病SD大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)表达和氧化应激的影响。方法SD雄性大鼠40只,选10只为正常对照组(I)用基础饲料喂养。另30只,采用高脂高糖饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)注射诱导2型糖尿病肾病模型(2型DN)。DN成模20只,均分为甘油三酯组(TAG,II)和甘油二酯两组(DAG,III)分别用TAG、DAG饲料持续喂养8w两组饲料组分(%)除TAG、DAG不同外,其余均相同,为:酪蛋白纤维素粉4,矿物质混合物3.5,维生素混合物1,淀粉61.5。实验第2、4、6、8w分别检测空腹血糖(FBG);实验结束前检测24h尿蛋白(UPRO)、血肌酐(SCR);采用苏木精-伊红(HE)染色和Massion染色观察肾脏的病理变化;采用试剂盒法检测肾皮质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化酶(GSH)活性;免疫组化法检测肾脏中PKC的表达。结果与II组比较,III组可以显著降低模型大鼠FBG(P<0.05),UPRO排泄率显著减少(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),肾组织病理改变减轻,并且肾组织内PKC表达下调(P<0.05)。结论 DAG能改善DN大鼠肾功能,抑制氧化应激反应,下调PKC表达,延缓DN的发生发展;推测DAG保护2型糖尿病大鼠肾脏的机制与其有关。
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