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脑心肌炎病毒3C蛋白抑制IFN-β信号通路的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 闭璟珊 1 ; 杜以军 2 ; 白娟 1 ; 姜平 1 ;

作者机构： 1.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省动物疫病控制与繁育重点实验室

关键词： 脑心肌炎病毒(EMCV);3C蛋白;Ⅰ型干扰素

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2014 年 37 卷 03 期

页码： 92-96

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探讨脑心肌炎病毒(EMCV)非结构蛋白3C对IFN-β信号通路的影响,采用RT-PCR方法构建EMCV 3C蛋白的重组真核表达质粒pVAX1-3C,将其转染至HeLa细胞,采用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot验证其在真核细胞内的表达和分布定位情况;利用Real-time PCR方法检测HeLa细胞表达EMCV 3C蛋白后Ⅰ型干扰素(IFN)效应因子的相对表达量,并用含有双荧光素酶(Luc)报告基因的重组载体检测分析3C蛋白在Ⅰ型IFN信号通路中的作用。结果表明:成功构建pVAX1-3C真核表达质粒,该重组质粒能在HeLa细胞内表达,并分布在细胞核中;pVAX1-3C重组质粒转染组细胞中Ⅰ型IFN效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS、PKR的相对表达量明显低于阴性对照;在双荧光素酶试验中,用poly(I:C)刺激各处理组后进行检测,转染了pVAX1-3C的细胞中IFN-β、IRF3及PRDⅡ启动子驱动的荧光素酶的表达量明显低于阴性对照;ISRE启动子驱动的荧光素酶结果显示,用IFN-β刺激后,与阴性对照组相比,转染pVAX1-3C的细胞中ISRE启动子的活性受到抑制。结论:EMCV 3C蛋白能够下调细胞Ⅰ型IFN效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS、PKR的mRNA水平,并能下调IFN-β、IRF3、PRDⅡ及ISRE启动子的活性,首次证明EMCV 3C蛋白能够抑制IFN-β信号通路。

  • 相关文献

[1]FMDV 3C蛋白抑制JAK-STAT信号通路的机制研究. 杜以军,闭璟珊,孙文博,吴香菊,刘纪玉,吴家强. 2014

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