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猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 李建达 1 ; 于江 2 ; 张玉玉 2 ; 任素芳 2 ; 陈蕾 2 ; 郭立辉 2 ; 孙文博 2 ; 陈智 2 ; 王淞 1 ; 刘俊珍 2 ; 杜以军 2 ; 李俊 2 ; 杨灵芝 3 ; 王金宝 1 ; 吴家强 2 ;

作者机构: 1.青岛农业大学动物科技学院

2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

3.山东滨州沃华生物工程有限公司

关键词: 猪链球菌2型;实时荧光定量PCR;敏感性;特异性;重复性

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2016 年 43 卷 12 期

页码: 3107-3113

收录情况: 北大核心

摘要: 试验根据猪链球菌2型荚膜多糖(CPS)抗原设计CPS2J基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×101拷贝/μL,是普通PCR的10倍;特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌;重复性试验变异系数为0.37%~0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规PCR方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。

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