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猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 田云飞 1 ; 胡悦 1 ; 齐静 1 ; 吴香菊 1 ; 孙吉谦 1 ; 崔云前 1 ; 刘新利 1 ; 杜以军 1 ;

作者机构： 1.齐鲁工业大学生物工程学院;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东省农业科学院生物技术研究中心;山东省青岛市西海岸新区畜牧兽医局

关键词： Mx1基因;真核表达;抗病毒蛋白;蛋白分段;免疫印迹

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2019 年 04 期

页码： 65-69

收录情况： 北大核心

摘要： 试验旨在通过对猪Mx1基因及其分段基因的真核表达载体的构建和鉴定,为进一步研究Mx1基因的功能奠定基础。试验以猪Mx1的基因序列为基础,以真核表达质粒pXJ41为载体,依据Mx1的蛋白结构进行分段,添加了Flag标签,构建了Mx1及Mx1分段基因的真核表达质粒,分别命名为pXJ41-Flag-Mx1、pXJ41-Flag-G、pXJ41-Flag-GMD、pXJ41-Flag-MDL4、pXJ41-Flag-GED。然后通过免疫印迹试验检测上述质粒在HEK-293T细胞中的表达情况,通过间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白在细胞内的定位情况。免疫印迹试验成功检测到了Mx1及Mx1分段基因的蛋白条带,间接免疫荧光试验检测到各目的蛋白定位于细胞质。上述真核表达质粒可在HEK-293T细胞中成功表达,Mx1及其分段真核表达质粒的构建和成功表达及定位对进一步探索Mx1的功能及机制奠定了基础。

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