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H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用

文献类型: 中文期刊

作者: 朱彤 1 ; 商瑞 1 ; 程凯慧 1 ; 于志君 1 ; 吴家强 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院家禽研究所;山东师范大学生命科学学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: H13亚型禽流感病毒;荧光定量PCR;检测;HA基因

期刊名称: 病毒学报

ISSN: 1000-8721

年卷期: 2022 年 01 期

页码: 1-7

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: H13亚型禽流感病毒以往只在海鸥、鸭等水禽中被发现,2018年,我们实验室报道了蛋鸡感染H13亚型禽流感病毒的证据,表明H13亚型禽流感病毒存在从水禽中溢出感染陆禽的风险,因而有必要加强对H13亚型禽流感病毒的监测。实时荧光定量PCR由于具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等优点,在病原监测工作中得到了广泛应用。本研究以H13亚型禽流感病毒的HA基因作为靶基因,设计了一对特异性荧光定量PCR检测引物,通过特异性试验、敏感性试验等,建立了H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法,并应用建立的检测方法对海鸥粪便样品进行核酸检测。实验结果发现,该检测方法的灵敏度为1.60×10~0拷贝/μL;该检测方法对H1、H3、H5、H6、H7和H9等6个亚型的禽流感病毒无交叉反应;该检测方法的敏感性是常规PCR的10倍;海鸥粪便样品中H13亚型禽流感病毒的核酸检测阳性率为18.8%。我们建立的H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强等特点,该检测方法可用于大量临床样品的快速检测,为H13亚型禽流感病毒监测工作的顺利开展提供了技术支撑。

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