文献类型： 中文期刊

作者： 周明明 ¹ ; 王加才 ² ; 姜宁朋 ³ ; 丛晓燕 ¹ ; 陈蕾 ¹ ; 吴家强 ¹ ; 李俊 ⁴ ; 杜以军 ⁴ ; 王金宝 ¹ ;

作者机构： 1.山东大学生命科学学院

2.山东畜牧兽医职业学院

3.山东省科技服务发展推进中心

4.山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室/山东省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪;核糖核酸酶L;抗病毒;先天性免疫

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2016 年 48 卷 08 期

页码： 69-72

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究猪核糖核酸酶L(sRNase L)的抗病毒能力,利用pXJ41载体构建猪RNase L基因真核表达载体pXJ41-sRNase L,采用poly(I∶C)转染PK-15细胞刺激诱导sRNase L基因转录mRNA;根据Gen Bank上sRNase L基因编码区序列设计引物并加入真核表达增强序列Kozak序列,通过RT-PCR扩增sRNase L编码基因序列,并将其克隆至真核表达载体pXJ41,通过双酶切和测序鉴定重组质粒;将重组表达载体pXJ41-sRNase L转染Marc-145细胞,Western blot检测sRNase L在Marc-145细胞中表达。结果显示:成功扩增得到sRNase L基因全长;成功克隆至真核表达载体pXJ41并能够在Marc-145细胞中成功表达。结果表明:成功构建了真核表达载体pXJ41-sRNase L并在Marc-145细胞中实现了sRNase L的表达,为进一步研究sRNase L在猪体内先天性免疫中抗病毒能力及其机制提供了条件。