科研产出
OC-I△D86(ORYZACYSTATIN-I△D86)基因的原核表达及活性分析
《生物工程学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：根据OC-1△D86基因序列.设计合成了7条寡核苷酸片段.通过重叠延伸PCR技术合成了OC-I△D86基因,利用设计好的BAMH1/XHO I酶切位点将OC-I△D86基因克隆到原核表达载体PET21B中,在1 MMOL/L的IPTG诱导后5 H,OC-I△D86融合基因在大肠杆菌中得到表达,表达产物处于可溶状态,其表达量占总蛋白的11.4%,可溶性蛋白的16.4%:利用NI-NTA系统纯化该蛋白并经PEG20000浓缩后.活性分析表明该蛋白酶抑制剂在体外表现出对木瓜蛋白酶明显的抑制作用,这为转OC-I△LD86基因的抗根结线虫植物基因工程抗体制备,以及进一步体内的抗根结线虫研究奠定了基础.
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美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化
《动物医学进展 》 2006
摘要：对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型 欧洲型 N蛋白抗原多肽 原核表达 纯化
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粉红聚端孢菌胞外几丁质酶纯化、特性及抗菌活性
《植物病理学报 》 2002 北大核心 CSCD
摘要：粉红聚端孢菌 (Trichothecium roseum)在 SMCS中恒温摇床 (2 0 0 r/ min,2 8℃ )上培养 12 d,诱导产生了大量的胞外几丁质酶。培养滤液经 (NH4) 2 SO4分级沉淀、DEAE- Sepharose FF阴离子交换柱层析和 CM- Sepharose FF阳离子交换柱层析获得了 SDS- PAGE纯的胞外几丁质酶 ,分子量约为39k Da。几丁质酶最适作用温度为 4 0℃ ,最适 p H范围为 4 .0～ 7.0。抗菌活性显示 ,纯酶对供试病原菌都有不同程度的抑菌作用 ,其中对棉花黄萎菌的抑制作用最强。
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