科研产出
大葱离体雌核发育诱导单倍体研究
《山东农业科学 》 2018
摘要：以大葱未开放花蕾为试材,研究花蕾大小、培养基、外源激素浓度配比不同对大葱离体雌核诱导单倍体的影响,旨在建立大葱离体雌核发育诱导单倍体技术体系。结果表明:直径为2. 0～2. 5 mm的未开放花蕾为最适外植体;在MS培养基中添加1. 0 mg·L-12,4-D和1. 5 mg·L-16-BA时,其雌核发育胚诱导率可达3. 5%;在B5培养基中添加1. 0 mg·L-12,4-D和1. 0 mg·L-16-BA时,其雌核发育胚诱导率可达2. 5%。将雌核发育胚转移至不含外源激素的1/2MS培养基中诱导生根,可发育成完整植株。通过根尖染色体计数分析,136株再生植株中有15株为单倍体,单倍率11%。由单倍体加倍获得的双单倍体是重要性状遗传分析、分子标记及数量性状研究的理想材料,此研究可为大葱遗传育种奠定基础。
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洋葱S型细胞质雄性不育相关基因的挖掘及分子标记开发
《园艺学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以洋葱(Allium cepa L.)S型细胞质雄性不育系和保持系材料为试材,对洋葱线粒体全基因组中的58个开放阅读框(ORF)进行差异表达分析,发现了一个表达差异片段orf393。采用实时荧光定量PCR技术,利用洋葱S型细胞质雄性不育系和保持系的根,叶片,花茎以及花粉母细胞、四分体、单核花粉粒、成熟花粉粒等4个发育时期的花蕾对orf393进行时空表达分析。结果表明:orf393在洋葱S型细胞质雄性不育系的根、叶片、花茎和4个发育时期的花蕾中均有表达,尤其是在四分体时期花蕾中表达量最高,之后恢复到营养生长时期的表达水平,但在保持系中未见其表达,这表明orf393是组成型表达,可能与洋葱的花粉发育存在某种关联。利用orf393在S型细胞质雄性不育系和保持系之间的序列差异,开发了一个稳定可靠的鉴别洋葱细胞质类型的SCAR分子标记GXX393。
关键词： 洋葱 细胞质雄性不育 orf393 基因表达 分子标记
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洋葱AcPME基因的克隆及序列分析
《山东农业科学 》 2017
摘要：以洋葱花蕾为试材,通过RACE试验获得了Ac PME基因的全长c DNA序列,Gen Bank登录号为JF913196.1。该基因DNA序列包含2 786个碱基,4个外显子,3个内含子,c DNA序列长度为2 228 bp,编码序列长度为2 001 bp,编码666个氨基酸。生物信息学分析显示Ac PME蛋白存在明显的信号肽和跨膜区域(SP/TM)、PMEI结构域和PME结构域,在PME家族分类中属于第Ⅰ类,即含有一个长的N末端前区域(PRO-region)。氨基酸同源比对与系统进化分析表明,Ac PME蛋白与水稻、玉米、高粱等单子叶植物的同源蛋白具有较高的一致性。三维结构模式图显示该蛋白具有一个明显的凹沟,4个果胶结合位点氨基酸残基(T423、Q453、R565和W567),2个活性位点氨基酸残基(D476和D497)。本研究为洋葱Ac PME基因的结构域蛋白互作及功能研究奠定了基础。
关键词： 洋葱 果胶甲酯酶(PME) 克隆 序列分析
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记的开发
《山东农业科学 》 2015
摘要：根据细香葱orf A501开发的特异引物,以洋葱细胞质雄性不育系为试材进行PCR扩增,对获得的片段进行回收测序,根据测序结果设计引物进行染色体步移,获得部分侧翼序列,开发了鉴定洋葱细胞质基因型的SCAR标记,命名为OC2175。该标记在洋葱不育系中扩增出一条2 175 bp的特异条带和1 053 bp的条带,而保持系中仅扩增出1 053 bp的条带。对17组不同遗传背景的不育系及其相应的保持系进行验证,该SCAR标记的鉴定结果与田间表型判断结果完全吻合。
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洋葱氮磷钾肥配施效应模型构建及其推荐用量研究
《中国土壤与肥料 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究安丘市洋葱对氮、磷、钾肥的肥效反应和适宜用量,采用"3414"试验方案设计,研究肥料配施对洋葱产量的影响及最高产量和最佳经济效益时氮、磷、钾肥的推荐施用量。结果表明,氮、磷、钾肥配施可显著提高洋葱产量,最大增产率达103.99%。氮、磷、钾肥间存在明显的交互作用,各因素对洋葱产量的影响顺序为钾>氮>磷,高量处理均表现为产量减少。经回归模型的拟合表明,本试验不适合用三元二次肥效模型;二元二次和一元二次肥效模型可较好地表达施肥量与产量间的关系。通过肥效模型计算可知,洋葱达到最高产量时氮(N)、磷(P2O5)、钾(K2O)的施入量分别为1 443.4、2 359.4、1 632.0 kg/hm2,达到最佳经济产量时氮(N)、磷(P2O5)、钾(K2O)的施入量分别为1 343.2、1 852.3、1 400.2 kg/hm2。
关键词： 洋葱 “3414”肥效试验 肥效模型 产量
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记研究进展
《中国蔬菜 》 2015 北大核心
摘要：洋葱是典型的异花授粉蔬菜作物,利用雄性不育系是进行洋葱杂交种选育的重要手段。传统的测交方法鉴定洋葱雄性不育基因型需要4~8a时间,通过开发洋葱细胞质雄性不育基因分子标记可以大大提高保持系选择效率,有助于揭示雄性不育作用机理。本文介绍了洋葱细胞质雄性不育的几种类型,对控制洋葱育性的细胞质与细胞核基因分子标记的研究进展进行了综述,讨论了分子标记技术的现状及存在的问题,并对应用前景进行了展望。
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钙、镁、硫、硅用量对大葱产量的影响
《中国土壤与肥料 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以章丘大葱为试验材料,利用正交设计,对钙、镁、硫、硅4个因素在3个水平上对大葱产量的影响进行了研究。结果表明:4种元素中,各因素水平的变化对大葱产量的影响为硅>镁>钙>硫。通过多重比较分析确定了钙、镁、硫、硅最佳施用量分别为135、45、225、180 kg/hm2。处理5(Ca 135 kg/hm2,Mg 45 kg/hm2,S225 kg/hm2,Si 60 kg/hm2)与最佳施肥量组合最接近,并且处理5的产量最高,与其他处理存在极显著差异,为本试验条件下的最佳处理。
关键词： 大葱 钙、镁、硫、硅肥用量 产量
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洋葱Ms位点多重PCR标记的开发与优化
《山东农业科学 》 2014
摘要：以本课题组已获得的洋葱Ms位点侧翼序列为基础,设计、筛选引物获得了一个兼容的多重PCR分子标记,并对其反应体系和反应程序进行了优化。优化后的扩增体系:10×PCR buffer(Mg2+free)2.5μL、25 mmol/L MgCl24μL、2.5 mmol/L dNTP 6μL、DNA模板1μL(约50 ng)、10μmol/L引物各1μL、5 U/μL rTaq聚合酶0.6μL、用灭菌双蒸水补齐至25μL;反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,65.4℃退火45 s,72℃延伸1 min,35个循环;最后72℃延伸10 min。优化后的体系和程序可以检测到清晰的目的条带,通过一次PCR反应即可鉴定Ms位点的3种基因型(MsMs、Msms、msms),操作简单,稳定性好。
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