科研产出
鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
《中国兽医学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：参照IBV S1基因序列,RT-PCR扩增长约867bp的S1基因主要抗原区域,将目的片段定向克隆到pET30α原核表达载体,转化Rossetta表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组S1蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的免疫活性。以该蛋白作为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗体的间接ELISA检测方法。该方法与其他6种常见禽病病毒(H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡法氏囊病毒(IBDV))阳性血清不发生交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;相对于HI试验的符合率、敏感性、特异性分别为91.58%、91.24%和92.31%;相对于IDEXX ELISA的符合率、敏感性、特异性分别为94.55%、95.42%和92.96%;应用该方法检测山东及周边地区2 685份免疫鸡和168份未免疫鸡血清样品,免疫合格率和阳性感染率分别为85.25%和17.26%。本试验截短表达的S1蛋白具有良好的免疫活性,建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,将为IBV的免疫抗体监测、临床野毒感染快速诊断和流行病学调查提供了一种新的血清学诊断技术,具有良好的推广应用前景。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 S1蛋白 截短表达 活性鉴定 间接ELISA 检测
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黄化曲叶病毒分子标记在番茄育苗中的应用
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：用DNA分子标记技术,对21份番茄种苗进行黄化曲叶病毒病(TYLCV,TY)抗病基因及病毒病感染检测。结果表明:9份材料携带ty-1/ty-1、ty-2/ty-2和Ty-3a/ty-3a抗性基因,1份材料携带ty-2/ty-2和Ty-3a/ty-3a抗性基因;自根苗欧迪斯、嫁接苗金棚/11-8、金棚/荣威和金棚/双飞8号已经感染TY。种苗进行田间种植,其中携带抗性基因的番茄品种没有发生TY,抗性较强;在已感染TY的4份材料中,欧迪斯田间表现感染TY,其余3份未发生TY。试验表明,TY分子标记技术检测可靠,可以在番茄育苗生产中推广应用。
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山东部分地区生牛乳中金黄色葡萄球菌的检测与分析
《食品与药品 》 2016
摘要：目的了解山东省部分地区的生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染情况。方法收集山东省3个地区的生牛乳样品204份,其中地区A 130份,地区B 60份,地区C 14份。利用金黄色葡萄球菌测试片初筛可疑菌株,分离纯化培养后,用API法鉴定是否为金黄色葡萄球菌,以此了解山东地区生牛乳中金黄色葡萄球菌的污染状况。结果地区A检出率为44.62%,地区B检出率为50.00%,地区C检出率为64.28%。结论山东地区金黄色葡萄球菌污染情况存在一定差异,明显高于文献报道安徽、重庆地区的污染率。
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桃病毒病及检测技术研究进展
《北方园艺 》 2016 北大核心
摘要：病毒病已成为危害桃树等果树生长的重要病害。现从桃病毒病的主要种类、分布与危害、分子生物学特性、传播途径和检测方法等方面综述了国内外桃病毒病的研究进展。并提出桃病毒检测及预防的建议,旨在为病毒病的防治及桃产业的健康发展提供参考。
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鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用
《动物医学进展 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。
关键词： 鸡 天然免疫 受体与配体 检测 实时荧光定量PCR
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2011—2015年新疆兵团市场肥料检测及分析
《现代农业科技 》 2016
摘要：[目的]为保障新疆兵团农资产品质量安全,全面了解新疆兵团2011—2015年肥料市场产品质量的现状。[方法]以新疆兵团12个师为研究区域,2011—2015年共采集951个样品,涉及到五大类肥料,使用原子吸收光谱法、氨基酸分析仪法、滴定法、重量法、比色法测定肥料中铁、锌、锰、铜、游离氨基酸、钙、镁、有机质、总氮、钾、磷、钼、硼含量,执行国家、行业、企业标准,按照标识的产品标准进行检验和判定。[结果]2011—2015年,新疆兵团肥料抽检合格率依次为81.6%、83.3%、79.3%、82.0%、91.5%,其中微量元素肥料的合格率最低,为48.8%,单一元素肥料合格率较高,为90.6%。[结论]就目前看,新疆兵团肥料市场发展良好,但应继续加大对兵团农资市场的质量监管工作。
关键词： 新疆兵团 肥料 检测 分析 2011—2015年
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鸡体抗病毒蛋白基因荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用
《山东农业科学 》 2016
摘要：为建立检测鸡干扰素诱生的3种抗病毒蛋白(IFIT5、PKR和OASL)基因表达水平的荧光定量PCR方法,并将其应用于实践,本研究设计和筛选了3个基因的特异性扩增引物,制备了各基因的质粒标准品,绘制了荧光定量PCR的标准曲线,并检测了该方法的灵敏度、重复性和特异性。结果表明所建立的方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好,应用该方法检测了新城疫病毒感染SPF鸡胚后相关基因的表达情况,发现在病毒感染后IFIT5、PKR与OASL基因的表达水平均迅速提高。
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盐酸林可霉素制剂中对乙酰氨基酚检测方法的研究
《山东农业科学 》 2015
摘要：采用Waters AtlantisT3(4.6 mm×250 mm,5μm)C18色谱柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(70∶30)作为流动相进行等度洗脱(流速1.0 m L/min);采用二极管阵列检测器,检测波长244 nm;进样量20μL,建立盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚检测的高效液相色谱方法。结果表明:对乙酰氨基酚在进样浓度0.02014~0.4028 mg/m L范围内均呈良好线性关系(R2=1.0000),平均回收率分别为100.15%(盐酸林可霉素注射液)和99.90%(盐酸林可霉素可溶性粉),检出限为0.01 mg/m L。该方法简便、准确、可行,适用于盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚的检测。
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山东泰安甜樱桃“花叶病”树体症状观察及病毒检测
《植物保护 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了探明山东泰安患有"花叶病"的甜樱桃树体内感染病毒的种类,本研究以嫁接在3种不同砧木上的甜樱桃品种‘红灯’叶片为试验材料,提取植物样本总RNA,采用随机六聚体引物反转录,选取10种甜樱桃病毒作为检测对象,根据各病毒基因组序列设计特异引物,进行RT-PCR检测。结果显示,10种甜樱桃待检病毒中,5种病毒检测结果呈阳性,分别为PNRSV(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、PDV(Prune dwarf virus,PDV)、CVA(Cherry virus A,CVA)、CGRMV(Cherry green ring mottle virus,CGRMV)、LChV-2(Little cherry virus-2,LChV-2),各病毒检出率较高。各"花叶病"甜樱桃样品均至少同时感染2种病毒,多病毒复合感染比例较高。
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