科研产出
花生区组间杂种未成熟籽仁cDNA PCR库的构建与初步筛选
《花生学报 》 2003
摘要：从不亲和野生花生Arachisglabrata Benth与栽培种种间杂种中提取mRNA,反转录成cDNA双链并连接上接头,用接头上的引物进行PCR高保真扩增,成功建立了花生cDNA PCR库。用光敏生物素标记的探针与链亲和素包被的磁珠进行杂交筛库,与探针杂交的片段经洗脱、高保真扩增并加A后与T载体连接,转化受体菌XL1-Blue,获得白色阳性克隆菌落。用PCR快速鉴定的方法进行阳性菌落筛选,得到目的阳性克隆后测序,将可得到cDNA全编码区序列。本研究为改良花生品质与抗性奠定了基础。
关键词： 花生 ω-6油酸去饱和酶(DES)基因 花生白藜芦醇合酶(RS)基因 克隆 cDNAPCR库构建 筛选
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小麦基因克隆研究进展
《麦类作物学报 》 2003 CSCD
摘要：小麦的基因克隆研究主要集中在品质、抗病、抗逆性、光合、春化等几个方面。在品质方面,已克隆了编码小麦高、低分子量谷蛋白亚基的基因、小麦淀粉合成酶基因及编码黑麦碱的基因;在抗病、抗逆性方面,已克隆了6个与白粉病有关的cDNA、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因、抗小麦根节线虫基因、盐胁迫应答基因、水分胁迫诱导基因、与重金属解毒有关的基因;另外,还克隆了小麦叶绿体基因组中与光合作用有关的psbA基因和与春化有关的基因Vrc79、Vrc54、Vrc203、Vrc17、Vrc28等。在小麦中还克隆到一个GTP结合蛋白的cDNA克隆、EIF转录因子的cDNA克隆及异构酶基因家族FKBP73基因的启动子序列。
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鸡α-干扰素基因的克隆及序列分析
《山东家禽 》 2003
摘要：利用RT-PCR方法,从ConA诱导的鸡淋巴细胞中扩增出鸡α-干扰素基因,经同源性比较,发现家禽α-干扰素核苷酸序列之间同源性较高,而与哺乳动物的同源性较低,说明家禽α-干扰素的生物学功能与哺乳动物可能存在一定差异。
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BT型细胞质雄性不育水稻及其三系的线粒体DNA研究
《西北植物学报 》 2001 CSCD
摘要：用 RAPD技术对 BT型水稻胞质雄性不育系秀 A及其保持系秀 B、恢复系湘晴以及杂种 F1代的线粒体 DNA进行了比较分析。结果表明不育系与其保持系间存在显著差异 ;不育系与其 F1之间 mt DNA也存在差异。在引物 OPJ- 0 8的扩增产物中 ,秀 A扩增出一条分子量为 80 0 bp的多态性片段 ;在引物 OPK- 1 0的扩增产物中 ,杂种 F1扩增出一条分子量为 90 0bp的片段。把这两片段回收、克隆并制备探针 ,OPJ- 0 880 0 的 Southern杂交结果显示不育系与其 F1杂交图谱存在多态性 ;OPK- 1 0 90 0 的 Southern杂交结果显示不育系与其保持系间存在差异。推测这两片段与育性可能有一定的联系
关键词： 水稻 细胞质雄性不育 线粒体DNA RAPD 克隆
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牛生长激素释放因子类似物基因的克隆与表达
《畜牧兽医学报 》 2000 北大核心
摘要：本研究以近期报道的高生物学活性、高代谢稳定性的牛生长激素释放因子类似物 (Ile2 ,Ala15,Leu2 7)bGRF(1- 2 9) -NH2 的氨基酸序列为模板 ,选用大肠杆菌高效表达所偏爱的密码子设计出该基因的全序列。采用化学合成法合成两个 3′末端有 19碱基互补的 80碱基的寡核苷酸片段。并互为模板和引物 ,通过酶促延伸合成完整的bGRF类似物基因 ,克隆于 pT7BlueT Vector中 ,通过蓝 /白筛选和酶切分析确定了阳性克隆。然后将目的基因从 pT7BlueT Vector克隆于pUC18载体中 ,以便多拷贝基因的制备。通过测序证明我们获得了目的克隆。将目的基因首尾串联 ,制备得到的 16拷贝基因在温控启动子PRPL 调控下于大肠杆菌中获得表达
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鸡产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针制备
《中国动物检疫 》 1994 北大核心
摘要：鸡产蛋下降综合征（EDS－76）病毒由鸭胚培养增殖，60％饱和度的（NH4）2SO4沉淀，经差速离心和蔗糖垫超速离心提纯病毒。蛋白酶K和SDS消化后，苯酚抽提、乙醇沉淀分离EDS－76病毒DNA。用HindⅢ、BamHI、PstI、EcoRI进行病毒DNA酶切图谱分析。EDS－76病毒DNA经PstI限制酸酶切与pUC19质粒载体连接，转化了JPA101大肠杆菌细胞，筛选带有插入片段的白色菌落，并将筛选的克隆进杆快速酶切鉴定;用光敏生物素标记制成探针。结果表明：所选克隆只与EDS-76病毒DNA杂交，克隆片段的为3kb，标记探针能检出10pg的EDS－76病毒DNA。
关键词： 鸡产蛋下降综合征病毒（EDSV） 基因克隆 核酸探针
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