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花生区组间杂种未成熟籽仁cDNA PCR库的构建与初步筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 王传堂 1 ; 杨新道 1 ; 陈殿绪 1 ; 王东 1 ;

作者机构: 1.山东省花生研究所

关键词: 花生;ω-6油酸去饱和酶(DES)基因;花生白藜芦醇合酶(RS)基因;克隆;cDNAPCR库构建;筛选

期刊名称: 花生学报

ISSN: 1002-4093

年卷期: 2003 年 32 卷 S1 期

页码: 291-294

摘要: 从不亲和野生花生Arachisglabrata Benth与栽培种种间杂种中提取mRNA,反转录成cDNA双链并连接上接头,用接头上的引物进行PCR高保真扩增,成功建立了花生cDNA PCR库。用光敏生物素标记的探针与链亲和素包被的磁珠进行杂交筛库,与探针杂交的片段经洗脱、高保真扩增并加A后与T载体连接,转化受体菌XL1-Blue,获得白色阳性克隆菌落。用PCR快速鉴定的方法进行阳性菌落筛选,得到目的阳性克隆后测序,将可得到cDNA全编码区序列。本研究为改良花生品质与抗性奠定了基础。

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