科研产出
水稻抗虫(Cry1C)和抗稻瘟病(Pi1,Pi2)材料的创制
《山东农业科学 》 2021
摘要：为了提高抗虫转基因水稻的稻瘟病抗性,利用已育成的以粳稻为遗传背景的抗虫转基因（Cry1C）水稻新品系济抗10号为受体,选择带有广谱高抗稻瘟病基因（Pi1,Pi2）的空育131为供体,通过杂交与多代回交进行抗虫和抗稻瘟病基因的聚合,对每一世代的后代单株通过分子标记辅助选择、田间抗病虫鉴定、田间农艺性状选择,创制出了4个抗虫和抗稻瘟病的新材料SK01、SK02、SK03、SK04,田间均表现出很好的抗虫、抗稻瘟病特性以及优质丰产性状,为黄淮稻区抗病虫水稻育种奠定了基础。
关键词： 水稻 Cry1C Pi1 Pi2 基因聚合 抗病虫水稻育种
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分子标记辅助选择培育低直链淀粉含量抗除草剂水稻
《华北农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了提高水稻的食味品质和生产实践,培育了低直链淀粉含量和抗咪唑啉酮类除草剂2种性状兼顾的水稻新品系.利用带有低直链淀粉含量的南粳9108作为软米基因的供体,与显性核不育分离群体中不育单株进行杂交,并用南粳9108作为轮回亲本回交2次得到BC2 F1群体,利用Wx-mq基因存在单核苷酸变异,对BC2 F1群体的单株进行四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)扩增,依据其PCR产物带型可以准确区分Wx-mq纯合基因型、Wx-mq杂合基因型、非Wx-mq纯合基因型,筛选出农艺性状优良带有低直链淀粉含量的不育和可育单株;然后利用带有抗咪唑乙盐酸基因(Acetolactate Synthase,ALS)的金粳818作为抗除草剂基因的供体,与筛选出的带有低直链淀粉含量的不育单株进行杂交得到F1群体,利用编码区ALS基因的碱基变异,进行等位基因特异PCR(AS-PCR)扩增,筛选出抗除草剂纯合基因型、感除草剂纯合基因型、抗除草剂杂合基因型.经ARMS-PCR鉴定结果表明,BC2 F1不育群体中检测得到172株单株带型与南粳9108一致,含有糯性基因,性状为糯性;160株单株不含糯性基因;468株单株带型为双亲的杂合基因型.通过AS-PCR进行除草剂抗性鉴定,结果表明,在F1群体1200个单株中,检测得到868个抗除草剂单株和332个感除草剂单株,其中纯合基因型624个,杂合基因型576个.经过逐代低直链淀粉含量和抗除草剂分子标记的选择,在F5选育出同时具有除草剂抗性的低直链淀粉含量的水稻新品系6个.
关键词： 水稻 咪唑乙烟酸 四引物扩增受阻突变体系PCR Wx-mq 分子标记 低直链淀粉
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基于焦磷酸测序技术建立基因编辑水稻检测方法
《生物技术进展 》 2020
摘要：基因编辑技术发展迅速,但对应的检测方法较少.为寻找创建基因编辑作物适用的检测方法,以PL3基因编辑水稻编辑位点为靶标,有效设计了焦磷酸测序的扩增引物及测序引物,并进行有效性检测,分别利用Sequence to Analyze等程序以及SNP和AQ两种模式完成了对PL3基因的定性和定量检测试验,建立了PL3基因编辑水稻编辑位点焦磷酸测序检测方法.结果表明,基于焦磷酸测序技术可以通过检测编辑位点从而将基因编辑型水稻与野生型水稻进行区分.与常规的转基因检测方法相比,该检测方法具有较好的准确性、高效性及高灵敏度等优点,在基因编辑型水稻编辑位点定性和定量检测分析方面具有很好的应用前景.
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利用CRISPR/Cas9技术编辑DTH8基因改良水稻99-25的抽穗期
《华北农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：CRISPR/Cas9基因编辑技术已经成为水稻育种的重要手段。为培育早熟、丰产、优质的种质资源,以农艺性状优良、迟熟粳稻品种香糯99-25为试验材料,构建了CRISPR/Cas9双靶点表达载体对抽穗期基因DTH8进行编辑,采用农杆菌介导法将构建好的表达载体转化农杆菌EHA105。用携带重组质粒的农杆菌菌液侵染水稻愈伤组织,成功获得了30株T0转基因苗。对T0植株利用潮霉素特异引物进行分子检测,其中阳性植株29株,阳性率高达96.7%。设计特异性引物对29株阳性苗的靶位点上下游600 bp进行PCR扩增测序,结果表明,7株转基因阳性苗在第2个靶点附近发生了碱基替换或插入突变。对这7株突变株系的抽穗期进行调查,发现DTH8-2、DTH8-5、DTH8-9、DTH8-10、DTH8-17、DTH8-21的抽穗期提前。利用实时荧光定量PCR检测发现DTH8-2、DTH8-9、DTH8-17与香糯99-25相比DTH8基因表达显著降低。成功利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对香糯99-25的DTH8基因进行了编辑,获得了抽穗期提前的DTH8突变体材料,为培育早熟、丰产、优质的水稻品种提供了种质资源。
关键词： 水稻 抽穗期 基因编辑 DTH8 CRSPR/Cas9
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播期和播量对水稻穴盘育秧苗素质的影响
《山东农业科学 》 2019
摘要：本试验基于穴盘育秧技术,开展了播期和穴播量对水稻秧苗素质的影响研究。结果表明,播期和穴播量对穴盘育秧水稻秧苗素质具有较明显的影响。秧苗地上部百株鲜重、干重、株高、叶龄、茎基宽等均随穴播量的增加而减小,部分指标在穴播5粒和6粒条件下随播期的推迟呈先增加后减小的趋势;百株秧苗根重及根条数随穴播量的增加而减小,穴播5粒和6粒处理的秧苗根重及根条数随播期的推迟呈先增加后减小的趋势。综合考量水稻生长期和播种密度,穴盘旱育秧条件下,适宜播期为5月20日,适宜播量为5粒/穴。
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不同浓度NaCl胁迫对水稻种子发芽及幼苗生长的影响
《大麦与谷类科学 》 2019
摘要：为明确不同浓度NaCl胁迫对水稻种子发芽及幼苗生长的影响,以圣稻19为材料,配制不同浓度的NaCl(80、120、160mmol/L)对水稻种子及幼苗进行胁迫处理,并对水稻种子萌发阶段的发芽势、发芽率、萌发指数、平均萌发时间和幼苗建成阶段的鲜质量、株高、根长进行测定。结果表明:随着NaCl处理浓度的升高,水稻种子的发芽势、发芽率、萌发指数呈递减趋势,平均发芽时间延长;NaCl(80、120、160 mmol/L)浸种后第10、第13、第16、第19天的幼苗鲜质量、株高、根长的增加均受到抑制,且与清水对照相比,低浓度NaCl(80 mmol/L)处理下种子的发芽势、发芽率、鲜质量、株高差异不显著;高浓度NaCl(160 mmol/L)处理下种子的发芽势、发芽率、萌发指数、平均发芽时间、鲜质量、株高均差异显著(P <0.05)。
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基于水稻机械旱栽秧技术的适宜秧龄及秧苗形态研究
《山东农业科学 》 2019
摘要：本试验基于水稻机械旱栽秧技术这种新的节水轻简栽培方法,开展了移栽过程中秧龄、秧苗形态对秧苗萎蔫及覆水后返青特征影响的研究。结果表明:与去土秧苗相比,带土团秧苗移栽后0.5 h墩萎蔫率仅为60%,墩萎蔫度为0.6,秧苗耐萎蔫效果明显;带土团秧苗覆水后24 h墩返青率即达到57.1%,且墩新根数达到1.5条,秧苗返青及新根快发优势明显;秧龄为20 d的秧苗移栽后2 h墩萎蔫率仅为55.6%,覆水后14 h的墩返青率已达83.3%,相比其它秧龄秧苗具有较强的耐萎蔫性和快速返青性能。因此,带土团秧苗为水稻机械旱移栽过程中较理想的秧苗形态,20 d秧龄为水稻机械旱栽秧的最佳秧龄。
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