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花生NADH脱氢酶1亚基10B-like基因克隆表达分析及载体构建

《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:NADH脱氢酶是线粒体氧化呼吸链上重要的复合物,对线粒体功能有至关重要的作用。本研究以花生品种"日花1号"为材料,利用RACE方法成功得到NADH脱氢酶1亚基10B-like基因(ND1-10B-like)的c DNA和DNA全长。基因开放阅读框为321 bp,编码106个氨基酸组成的肽链,预测的蛋白质分子量为12 570.29 Da,等电点为6.97。DNA序列包含一个内含子和两个外显子,共1 269 bp。检测了基因组织表达和胁迫表达情况,结果显示该基因在叶片中表达量最高,在青枯菌胁迫条件下0.5 h表达量即可升高到初始值的5.7倍,对生物胁迫反应非常迅速。并进一步构建了基因过表达载体p CAMBIA2300-OE-ND1和反义表达载体p CAMBIA2300-IN-ND1,并为进一步研究花生中该基因的功能及其在花生抗青枯病中的作用提供帮助。

关键词: 花生 日花1号 NADH脱氢酶1亚基10B-like 载体构建

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凹唇壁蜂滞育后阶段过冷却能力及生化物质动态变化

《应用昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:[目的]凹唇壁蜂Osmia excavata Alfken是我国北方果树的主要授粉昆虫,发挥着重要的传粉增产生态服务功能.掌握其滞育后阶段抗寒性特点,并从生理生化水平上探讨耐寒机制,对于凹唇壁蜂的保护与利用具有重要意义.[方法]本文系统测定了滞育后阶段及出茧后凹唇壁蜂雌蜂、雄蜂的过冷却点、冰点,自由水、脂肪、蛋白质、海藻糖含量,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性.[结果]凹唇壁蜂雌蜂、雄蜂的抗寒性差异不大,滞育后阶段过冷却点和冰点在出茧前逐渐升高、出茧后降低.其中,出茧日凹唇壁蜂雌蜂、雄蜂的过冷却点、冰点最高(抗寒性最低),分别为-12.35 ℃、-9.98 ℃和-12.63 ℃、-8.91 ℃.在滞育后阶段雄蜂脂肪含量显著高于雌蜂,雌蜂的蛋白质含量显著高于雄蜂,出茧后雄蜂的脂肪含量均迅速下降,雌蜂的蛋白含量迅速下降.出茧前,雄蜂的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、乙酰胆碱酯酶酶活性高于雌蜂;出茧后,雌蜂的酶活显著升高.在滞育后阶段,凹唇壁蜂雌蜂、雄蜂体内的海藻糖均呈显著降低趋势,出茧日雌蜂的海藻糖含量比茧后190 d下降了64.5%.[结论]滞育后阶段凹唇壁蜂有较强的抗寒性.在出茧前抗寒性逐渐降低,出茧后抗寒性升高.海藻糖代谢可能是凹唇壁蜂滞育后阶段能量消耗的重要途径.雄蜂的个体较小,但是有比雌蜂功能更强的抗氧化系统.

关键词: 凹唇壁蜂 滞育后阶段 过冷却点 冰点 生化物质

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平邑甜茶MhSnRK1在番茄中超表达对种子萌发及幼苗生长的影响

《园艺学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:为探讨蔗糖非发酵–1–相关蛋白激酶–1(SnRK1)对种子萌发及幼苗生长的调控作用,以超表达平邑甜茶MhSnRK1的番茄株系O-7、O-9和其野生型(WT)为试材,研究MhSnRK1对番茄种子萌发及幼苗生长发育的影响。结果表明,WT、O-7和O-9在MS培养基中种子发芽率均为100%,在MS+100 mmol·L~(-1)海藻糖培养基中发芽率显著降低,分别为23.3%、70.3%和67.7%;在MS培养基中O-7和O-9的SnRK1活性分别比WT高12.1%和2.3%,在海藻糖培养基中WT、O-7和O-9比在MS培养基中分别降低41.5%、35.5%和27.5%,O-7和O-9仍高于WT,可见在一定范围内较高的SnRK1活性促进种子的萌发。播种后14 d,与其他培养基中相比,海藻糖培养基中幼苗主根的长度最短,其中WT显著短于O-7和O-9;幼苗下胚轴的伸长较MS培养基中明显受到抑制,且WT受抑制的程度更大;在海藻糖培养基中添加0.3 mg·g~(-1)的IAA,WT下胚轴伸长受到的抑制得到解除。播种后30 d,海藻糖培养基中,与O-7和O-9相比,WT表现为子叶平整肥厚,真叶发育良好,叶面积较大,叶绿素含量显著高于O-7和O-9。上述结果表明,平邑甜茶MhSnRK1在番茄中超表达调控种子的萌发及幼苗的生长;在一定范围内,较高的SnRK1活性促进种子的萌发、抑制幼苗主根和下胚轴的伸长,较低的SnRK1活性更有利于幼苗的生长发育。

关键词: 平邑甜茶 MhSnRK1 番茄 SnRK1活性 种子发芽率 下胚轴

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凹唇壁蜂为油菜授粉的行为特征及经济价值评估

《应用昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:[目的] 凹唇壁蜂Osmia excavata Alfken是近年来被迅速应用的一种传粉昆虫.明确凹唇壁蜂对油菜的授粉行为、授粉效果,评估凹唇壁蜂对油菜的授粉功能量及经济服务价值,有利于加深社会对凹唇壁蜂的认知并促进其在油菜上的推广应用.[方法]在油菜田内,于油菜开花前,把油菜区域划定为凹唇壁蜂授粉区、隔离授粉区两个区域,实验过程中用摄像机记录凹唇壁蜂授粉行为和效果.采用蜜蜂依存度市场估价法,结合我国国情,评估2015年间油菜凹唇壁蜂授粉的经济价值,并探索凹唇壁蜂对油菜生产的重要性.[结果]60%以上的凹唇壁蜂在上午7:00到8:00出巢,下午4:30到5:30归巢,日出巢活动时间约9.58 h.凹唇壁蜂在每朵花上平均停留时间达10.89 s.凹唇壁蜂授粉区在单角果鲜重、结角果率、单角果籽粒数上比隔离授粉区分别提高2.74%、4.81%、11.48%.结合2015年数据,计算得出凹唇壁蜂对我国各省份油菜的授粉功能量超过373.3万吨,授粉服务总价值超过194.102亿元,从凹唇壁蜂授粉功能量和服务价值来看,凹唇壁蜂具有极大的生态价值、经济价值.[结论]凹唇壁蜂具有传粉优势,组织凹唇壁蜂在油菜花期进行辅助授粉,是提高油菜产量的一条重要途径,对提高油菜产生的经济效益具有积极的作用.凹唇壁蜂授粉是应该得到重视的生产投入,应当提高民众对凹唇壁蜂授粉价值的认知度.

关键词: 油菜 凹唇壁蜂 授粉行为 增产 经济价值

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壁蜂生物学特性与传粉服务功能

《应用昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:壁蜂是对蜜蜂总科(Apoidae)切叶蜂科(Megachilidae)壁蜂属(Osmia)的统称,主要分布北半球的温带区域,在自然生态系统和农田生态系统中均发挥着重要的传粉生态服务功能.壁蜂群居筑巢、接受人类提供的巢穴、一年一代的习性,使它们很容易被大量饲养,并且人们可以通过调节其在春节破茧羽化的时间与作物花期同步,为多种目标作物授粉.本文综述壁蜂的生物学和生态学特性、传粉功能及其影响因子,旨在于为发挥壁蜂的传粉功能提供参考.

关键词: 壁蜂 生物学特性 作物 传粉功能 影响因素

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QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中6种头孢菌素类抗生素残留

《色谱 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定牛奶中6种头孢菌素类抗生素的分析方法。牛奶样品加入含1%(v/v)醋酸的乙腈溶液提取,于45℃氮吹浓缩,经100 mg C18吸附剂净化后,采用HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,以0.1%(v/v)甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源、正离子模式(ESI+)下电离,多反应监测(MRM)模式下检测,外标法定量。结果表明,6种头孢菌素类抗生素在2~200μg/L质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.999,方法的检出限为0.2~0.6μg/kg、定量限为0.8~2.0μg/kg。在8、16和80μg/kg的加标水平下,6种头孢菌素类抗生素的回收率为75.1%~94.4%,相对标准偏差为0.63%~8.3%。该方法简单快捷,准确可靠,适用于牛奶中头孢菌素类抗生素残留的同时测定。

关键词: 超高效液相色谱-串联质谱 QuEChERS 头孢菌素类抗生素 牛奶

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万寿菊生物熏蒸对连作苹果幼苗和土壤微生物的影响

《土壤学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:以苹果(平邑甜茶)幼苗为试验材料,盆栽条件下以万寿菊植株风干粉末拌土熏蒸老苹果园土壤,为环境友好型熏蒸措施防控苹果连作障碍提供理论依据。试验设置老龄苹果园土壤对照(未作处理,CK)、覆膜(未拌入万寿菊,F)、万寿菊1.5 g kg~(-1)+覆膜(1.5T+F)、万寿菊6.0 g kg~(-1)+覆膜(6.0T+F)、万寿菊15.0 g kg~(-1)+覆膜(15.0T+F)。结果表明,与对照相比,万寿菊生物熏蒸处理能显著提高连作土壤中平邑甜茶幼苗的生物量,促进根系生长,提高土壤酶活性,土壤真菌减少、细菌增多。6.0 g kg~(-1)处理的效果最明显,幼苗地上部及根系干重分别为对照的8.1倍、13.1倍,根表面积及根体积分别增加了333.0%、548.4%;脲酶、磷酸酶活性分别较对照高103.6%、77.6%,蔗糖酶活性高出200.4%,过氧化氢酶活性升高64.6%;土壤细菌/真菌比值为219.9,是对照的5.6倍;真菌多样性、均匀度和丰富度指数均降低,优势度指数增加;层出镰孢菌基因拷贝数较对照降低57.9%。主成分分析(PCA)结果显示,万寿菊生物熏蒸处理对连作土壤真菌群落多样性有显著影响,能够显著减少层出镰孢菌的数量。综上,连作土壤中添加6.0 g kg~(-1)万寿菊进行生物熏蒸可提高连作平邑甜茶幼苗生物量,改善连作土壤环境,有效缓解平邑甜茶的连作障碍。

关键词: 平邑甜茶 连作障碍 万寿菊 生物熏蒸 土壤酶活性 层出镰孢菌

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柿树的EST-SSR标记开发

《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:柿树是中国重要经济树种。为了开发柿树SSR标记,从NCBI的EST数据库中共下载14198条柿树EST序列,经过去冗余处理和SSR位点搜索,共筛选到1 320条EST-SSR序列可以用于引物设计。实验中随机选取了314对引物进行合成和筛选,共有127对引物成功扩增出多态性扩增条带,加上从已发表的柿子SSR引物中筛选出的14对多态性较高的引物,共利用141对引物,通过SSR分型检测数据分析,获得了可用于模型分析的异源六倍体柿树全同胞家系共141套分子标记的数据。柿树是一种六倍体树种,多态性标记的开发在柿树的遗传学研究和分子育种上将会有众多的应用,能够促进正对六倍体物种的遗传分析模型的开发,也将对一系列重要的六倍体农作物(小麦,甘蔗,棉花等)的研究有推动作用。

关键词: 柿树 EST-SSR 引物开发

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生长素与植物根尖干细胞巢的维持

《植物学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要:干细胞巢的维持与后代细胞的分化是多细胞高等生物个体发育的基础。生长素对植物茎尖和根尖分生组织的形态建成,尤其是对位于植物这2个末端的分生组织中心的干细胞巢的活性维持起着至关重要的作用。该文综述了近几年在植物根尖干细胞发育领域的研究进展,主要阐释了PLT蛋白途径、SCR-SHR蛋白途径以及环境因子多信号调控模块维持植物根尖分生组织中干细胞巢稳定的机制,揭示了生长素可以通过就近合成、极性运输以及信号转导3种方式参与这些信号模块的调控,从而维持生长素在根尖静止中心细胞附近干细胞巢的浓度梯度,精确地平衡植物干细胞巢中细胞的增殖与分化。

关键词: 根尖分生组织 干细胞巢 生长素 增殖与分化

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纹杆块与钉齿组合式轴流玉米脱粒滚筒的设计与试验

《农业工程学报 》 2018 EI 北大核心 CSCD

摘要:为解决黄淮海地区玉米直接进行籽粒收获破碎率和未脱净率高的问题,该文在分析现有脱粒滚筒结构特点的基础上,设计了组合式轴流玉米脱粒滚筒,选取滚筒转速、滚筒倾角和凹板间隙为试验因素,在自制的玉米脱粒试验台上进行了单因素试验和正交试验,并运用SAS统计分析软件对试验结果进行了分析。单因素试验结果表明:随着滚筒转速的增大,籽粒破碎率先降低后升高,未脱净率则急剧减小并趋于稳定;随着滚筒倾角的增大,籽粒破碎率和未脱净率则逐渐变小;随着凹板间隙的增大,籽粒破碎率先降低后升高,未脱净率先升高后降低并趋于稳定。正交试验结果表明:影响籽粒破碎率和未脱净率的主次因素顺序均为滚筒转速、滚筒倾角、凹板间隙,且转速430 r/min、滚筒倾角6?和凹板间隙55 mm时籽粒破碎率和未脱净率均最低。该研究可为高含水率玉米脱粒滚筒的设计提供参考。

关键词: 农业机械 玉米 脱粒 轴流滚筒 正交试验

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