科研产出
黄蒿丛枝病植原体的鉴定及其16SrDNA序列分析
《植物生理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：黄蒿为菊科蒿属一、二年生草本植物,在医学和植物病害生物防治方面具有重要价值。植原体是一类重要的病原物,常引起丛枝、小叶、黄化、簇生等症状。从山东泰山山涧采集到表现丛枝症状的感病黄蒿植株,以叶片总DNA为模板,利用植原体通用引物对R16F2n/R2进行PCR扩增,获得了大小为1 244 bp的片段,与葡萄黄化(Stolbur)植原体(AF248959)和纸花黄化植原体(JX128698)一致性分别为99.4%和99.8%。系统进化树显示,黄蒿丛枝病植原体(登录号:KT899994)与葡萄黄化(Stolbur)植原体(AF248959)和纸花黄化植原体(JX128698)处于同一分支。植原体分类鉴定在线工具i Phy Classifier分析结果显示,所获得的片段与16Sr XII-A亚组代表性植原体(AF248959)相似系数为1.0,表明黄蒿丛枝病植原体归属于16Sr XII-A亚组。利用葡萄黄化(Stolbur)植原体特异性引物对STOL4f/r进行PCR扩增,获得大小为1 754 bp的片段,与葡萄黄化(Stolbur)植原体(AF248959)一致性为99.5%,i Phy Classifier分析结果显示,该片段(登录号:KU759570)与AF248959相似系数为1.0,验证了植原体通用引物对R16F2n/R16R2分析结果的可靠性。综上,将黄蒿丛枝病植原体的分类地位确定为16Sr XII-A亚组。
关键词： 黄蒿丛枝病 葡萄黄化植原体 分子鉴定 16S rDNA序列分析
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一株新亚群禽白血病病毒全基因组序列分析
《畜牧兽医学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了解外源性禽白血病病毒(ALV)在山东省部分地区肉鸡中的流行状况,采集无菌抗凝血分离血浆接种DF-1细胞、ELISA p27抗原检测以及DNA提取进行PCR扩增等方法,从山东省某地区大型养殖场不同个体养殖场出栏肉鸡群中分离鉴定出1株ALV,命名为FC1505。分析其囊膜糖蛋白gp85氨基酸序列与近年来从地方品种鸡中疑似新亚群ALV-K分离株的相似性最高,相似性均在95%以上,而与其他已知亚群ALV的相似性均低于90%。为了进一步分析该分离株分子特性,对其进行全基因组测序,并与已知亚群ALV分离株序列进行比较。结果表明,FC1505分离株整个基因组中gag、pol和gp37基因相对保守,与ALV参考毒株序列相似性都在90%以上,但均与疑似K亚群的ALV分离株相似性最高;全基因组序列分析进一步说明FC1505属于ALV-K。本研究继我国江苏省和华南地区K亚群ALV报道后,首次从山东地区肉鸡中鉴定到一株ALV-K并完成其全基因组序列分析。
关键词： 商品肉鸡 禽白血病病毒 分离鉴定 全基因组序列分析
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猪流行性腹泻病毒变异株的分离鉴定及其S基因序列分析
《内蒙古大学学报(自然科学版) 》 2017 北大核心
摘要：为分析山东省2016年上半年猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株变异情况,用Vero细胞从仔猪临床腹泻样品中进行病毒分离,通过细胞病变(CPE)观察、聚合酶链式反应(PCR)方法、免疫荧光(IFA)试验、电镜观察、动物回归试验和测序分析,分离鉴定1株PEDV毒株(SDMY1401株).将该毒株进行S基因序列分析和遗传进化分析,结果表明该毒株为PEDV流行变异株.该毒株S基因核苷酸序列与山东省分离株CH-SDZC-2015和河南省分离株CHHNAY-2015同源性最高为99.4%,与疫苗毒株CV777同源性为94%.遗传进化分析表明该毒株与经典毒株DR13、疫苗毒株CV777及以前国内分离毒株在不同分支.
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蛋鸡肠道有益菌的分离与初步鉴定
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了分离蛋鸡肠道中存在的有益菌,试验采用常规分离方法对产蛋高峰期蛋鸡肠道中有益菌进行分离鉴定,测定了目标菌株的理化性质、体外抑菌效果,并进行了雏鸡安全性试验。结果表明:从蛋鸡空肠中分离出乳酸菌4株,分别为K1、K2、K3、K4;从盲肠中分离出乳酸菌1株,为M1;从盲肠中分离芽孢杆菌3株,分别为Y1、Y2、Y3。通过系列生理生化鉴定,初步确定以上乳酸菌依次为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌德氏亚种、德氏乳杆菌乳亚种和短乳杆菌,芽孢杆菌依次为枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。乳酸菌对大肠杆菌O2有较强的抑菌作用,K1、K2、K3、K4、M1的抑菌圈直径分别为18.30,16.07,11.45,17.26,10.26 mm;而芽孢杆菌抑菌作用相对较弱,Y1、Y2、Y3的抑菌圈直径分别为9.25,8.46,8.37 mm。雏鸡日饮活菌20亿个为安全剂量。
关键词： 蛋鸡 肠道 有益菌 分离 鉴定 理化性质 抑菌 安全性试验
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利用SSR标记技术鉴别玉米品种先玉696和先玉335的研究
《种子 》 2017 北大核心
摘要：先玉696和先玉335是亲缘关系比较近的2个品种,不仅外观形态一样,而且生化技术亦无法鉴别,本实验采用SSR分子标记技术,选用合适的引物,成功的将其区分开,避免了实验前期为筛选引物而耗费大量的时间和财物;同时在扩增产物的检测过程中采用8%的非变性凝胶电泳,比之变性胶电泳操作更为简便,此方法的应用可以为种子检验的同行提供一个便捷的实验途径。
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山东地区樱桃褐斑病病原鉴定及rDNA-ITS序列分析
《中国农业科技导报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为明确引起樱桃褐斑病的病原菌种类,采集泰安、潍坊、烟台3个地区典型发病叶片,用单孢分离法分离、纯化,共获得16个菌株,采用病原菌形态学与分子生物学相结合的方法,鉴定樱桃褐斑病的病原菌。对该病原菌的ITS序列分析显示,其与Gen Bank中登录的Passalora sp.属的Passalora arctostaphyli相似性达97%;与另一种在甜樱桃叶片中分离的病原菌Pseudocercospora pruni-persicicola相似度仅为85.6%,证明两者并非为同一属真菌。构建系统进化树表明,樱桃褐斑病病原与Passalora sp.属真菌处在同一分支,而与其它Prunus sp.属分离的病原菌处在两个分支,进而通过形态学鉴定和ITS序列分析认为,病原菌为Passalora circumscissa,并将其ITS基因序列提交至Gen Bank数据库(基因登陆号:KT428056)。
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凝结芽孢杆菌RY237 β-半乳糖苷酶酶学性质研究
《食品工业科技 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为研究乳品中具有应用价值的乳糖酶,以乳糖为唯一碳源,用邻硝基苯酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)法,从产乳酸的细菌中筛选出了产乳糖酶活力高的菌株RY237,其活性达4.98 U/m L,鉴定为凝结芽孢杆菌。研究了乳糖酶的酶学性质,该酶最适反应温度和最适p H分别为50℃和6.0。该酶在温度40~50℃具有良好的稳定性;p H5.5~8.0表现稳定,p H7.0出现酶活峰值。金属离子Ca~(2+)、K+、Zn~(2+)、Mn~(2+)、Na+、Mg~(2+)对酶活具有抑制作用,Cu~(2+)对酶活具有完全抑制作用,EDTA对酶活具有激活作用。凝结芽孢杆菌RY237乳糖酶活性高、性能优良,具有应用价值。
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核桃炭疽病病原菌鉴定及生物学特性
《山东农业大学学报(自然科学版) 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：本文从表现炭疽病症状的核桃果实上分离到一株具有强致病性菌株(TS-09),并进行了鉴定和生物学特性研究。经形态特征观察、培养性状以及r DNA-ITS、ACT、β-tub2、GPDH四种保守基因序列分析,TS-09菌株为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。生物学特性测定结果表明:TS-09菌株在PDA培养基上生长最好;25~30℃之间适宜菌株生长及产孢,28℃是菌株最适宜的生长及产孢温度;弱酸性环境(p H4.0)有利于产孢,中性环境(p H7.0)适宜菌丝生长;长时间光照抑制菌丝生长,黑暗条件有利于菌丝生长;菌丝的抗逆性较强,60℃处理15 min、62℃处理10 min,菌丝死亡。研究结果将为核桃炭疽病的预测及有效控制提供理论依据。
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