科研产出
花生△~(12)-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析
《花生学报 》 2007
摘要：根据已报道的△12-脂肪酸脱氢酶基因(FAD)的氨基酸保守序列设计引物进行RT-PCR扩增,得到花生△12-脂肪酸脱氢酶基因881bp部分cDNA序列,然后通过快速扩增cDNA末端技术(RACE),向两端延伸得到1410bp的花生△12-脂肪酸脱氢酶基因全长cDNA序列。序列分析表明有一个长1140bp、编码379个氨基酸残基的开放阅读框,所编码蛋白质的大小约为43kDa。推测的氨基酸序列具有膜整合蛋白酶特异性的3个组氨酸保守区;氨基酸疏水性分析结果表明,所编码的氨基酸序列存在2个具有膜固定蛋白(membrance-anchored protein)重要特征的疏水结构,2个疏水区共跨膜4次,这些特性表明所获得的序列为△12-脂肪酸脱氢酶基因。
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鸡β-防御素Gal-1 cDNA的克隆及序列分析
《家禽科学 》 2006
摘要：利用细胞总RNA提取试剂盒,从1月龄SPF鸡白细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素(Gal-1)cDNA片段。PCR产物经凝胶回收纯化后与pMD18-T载体连接,转化感受态JM109细胞,在含X-gal、IPTG的LB平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR与质粒限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段ORF大小为198bp,用Blast程序进行检索比较表明该序列与Genbank中发表的鸡Gal-1 cDNA编码区序列同源性高达99.5%。该cDNA序列编码65个氨基酸,包括信号肽、前片段和成熟肽,成熟肽由40个氨基酸残基组成。
关键词： β-防御素1(Gal-1) 基因克隆 序列分析
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分子生物学技术在甘薯中的应用
《分子植物育种 》 2006 CSCD
摘要：甘薯是重要的粮食作物,它的遗传背景复杂,分子生物学研究进展落后于水稻、玉米等作物。分子标记技术主要应用于甘薯的遗传图谱构建、遗传多样性分析以及亲缘关系分析等方面。目前,已经构建了数张遗传图谱,亲缘关系分析表明三浅裂野牵牛I.trifida与甘薯有很紧密的亲缘性。基因克隆技术已经应用于甘薯在抗逆、品质以及块根发育等相关基因的分离,为甘薯的分子育种带来了有益的目的基因。在栗子香、新大紫等甘薯品种有转基因的报道,采用农杆菌介导的方法,已经取得了少量的转基因植株。
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花生MADS-box基因片段的克隆(英文)
《花生学报 》 2005
摘要：MADS-box基因是一类调控植物生长发育的关键基因。在多序列比对的基础上设计兼并引物,成功地从栽培种花生JL24 DNA中扩增得到了130 bp的基因片段。序列比对结果表明,该片段与26个MADS-box基因表现高度的同源性(79%~84%),这表明花生MADS-box片段克隆成功。
关键词： MADS-box基因 基因克隆 花生
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小麦基因克隆研究进展
《麦类作物学报 》 2003 CSCD
摘要：小麦的基因克隆研究主要集中在品质、抗病、抗逆性、光合、春化等几个方面。在品质方面,已克隆了编码小麦高、低分子量谷蛋白亚基的基因、小麦淀粉合成酶基因及编码黑麦碱的基因;在抗病、抗逆性方面,已克隆了6个与白粉病有关的cDNA、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因、抗小麦根节线虫基因、盐胁迫应答基因、水分胁迫诱导基因、与重金属解毒有关的基因;另外,还克隆了小麦叶绿体基因组中与光合作用有关的psbA基因和与春化有关的基因Vrc79、Vrc54、Vrc203、Vrc17、Vrc28等。在小麦中还克隆到一个GTP结合蛋白的cDNA克隆、EIF转录因子的cDNA克隆及异构酶基因家族FKBP73基因的启动子序列。
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鸡α-干扰素基因的克隆及序列分析
《山东家禽 》 2003
摘要：利用RT-PCR方法,从ConA诱导的鸡淋巴细胞中扩增出鸡α-干扰素基因,经同源性比较,发现家禽α-干扰素核苷酸序列之间同源性较高,而与哺乳动物的同源性较低,说明家禽α-干扰素的生物学功能与哺乳动物可能存在一定差异。
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鸡产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针制备
《中国动物检疫 》 1994 北大核心
摘要：鸡产蛋下降综合征（EDS－76）病毒由鸭胚培养增殖，60％饱和度的（NH4）2SO4沉淀，经差速离心和蔗糖垫超速离心提纯病毒。蛋白酶K和SDS消化后，苯酚抽提、乙醇沉淀分离EDS－76病毒DNA。用HindⅢ、BamHI、PstI、EcoRI进行病毒DNA酶切图谱分析。EDS－76病毒DNA经PstI限制酸酶切与pUC19质粒载体连接，转化了JPA101大肠杆菌细胞，筛选带有插入片段的白色菌落，并将筛选的克隆进杆快速酶切鉴定;用光敏生物素标记制成探针。结果表明：所选克隆只与EDS-76病毒DNA杂交，克隆片段的为3kb，标记探针能检出10pg的EDS－76病毒DNA。
关键词： 鸡产蛋下降综合征病毒（EDSV） 基因克隆 核酸探针
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