科研产出
转基因玉米转化体特异性寡核苷酸芯片检测方法的研制
《作物学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%。在植物基因组与外源基因的连接区域,利用PrimerPremier5.0和Oligo6.0软件分别设计和筛选7种转基因玉米40merOligo转化体特异性探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片,并对芯片检测的特异性、重复性及检测灵敏度进行检验。证明所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。与PCR检测方法相比,基因芯片检测法灵敏度高、特异性强,可有效检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高检测的准确率和效率。
关键词： 转基因玉米 转化体特异性 寡核苷酸芯片 Oligo探针 灵敏度
全文链接
请求原文
转基因玉米多重PCR-基因芯片联用的检测方法
《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据7种转基因玉米(Zea mays)Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构分别设计转化体特异性引物,并对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%,在此基础上以玉米内参照基因(ZSSIIb)作对照,对Bt11、Mon810、TC1507和GA21、NK603、Bt176分别作了2对四重PCR反应。根据插入外源基因与插入位点植物基因组DNA的特异结构,分别设计和筛选了7种转基因玉米转化体特异性Oligo探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片。结果表明,所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。利用基因芯片检测方法结合多重PCR,建立并优化了1套三重PCR反应体系和两套四重PCR反应体系,可在1张芯片上同时有效地检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高了检测的准确率和效率。
关键词： 转基因玉米 转化体特异性检测 多重PCR Oligo探针
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
