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资源类型: 中文期刊
关键词:3D基因(模糊匹配)
共2条记录
鸭甲肝病毒RT-LAMP检测方法的建立

《家禽科学 》 2019

摘要:基于A型和C型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)3D基因的6个保守区域设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在60℃恒温保持45min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了鸭甲肝病毒的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法.该方法具有良好的特异性,除DHAV外,对其他4种常见鸭病的检测结果均为阴性.该方法对DHAV-A和DHAV-C病毒RNA的最低检出量均为0.1pg,是常规RT-PCR方法的10倍.临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为92.5%,而且对仪器要求低,适于基层实验室和现场检测.

关键词: 鸭甲肝病毒 3D基因 一步反转录环介导等温扩增 仪器要求低

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鸭甲型肝炎病毒1型3D基因克隆与表达

《家禽科学 》 2013

摘要:提取鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)RNA作为模板,进行RT-PCR扩增,得到714bp的3D基因,将纯化的3D基因片段与pMD18-T载体进行连接,构建DHAV-13D基因克隆重组质粒。然后定向插入到pET-32a(+)表达载体,筛选获得原核表达载体pET-32a-3D。经ITPG诱导,SDS-PAGE分析表明,3D基因得到正确表达,融合蛋白分子量为71.4kDa。Western blotting结果表明纯化的融合蛋白与DHAV-1阳性血清具有反应性。

关键词: DHAV-1 3D基因 克隆 表达

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