科研产出
鸭瘟病毒载体疫苗研究进展
《中国动物检疫 》 2024
摘要：疫苗接种是控制疫病的有效方法一,其中病毒载体疫苗以其转染效率高、外源基因表达水平高等优点成为当前疫苗的重要研究方向。鸭瘟病毒基因非常适合作为插入和表达其他病原体的外源抗原基因,并且随着CRISPR/Cas9技术、细菌人工染色体技术、同源重组技术等基因编辑技术的发展,鸭瘟病毒作为最有前途的载体被广泛应用于传染病疫苗研发。经试验验证,基于重组鸭瘟病毒载体的禽细菌病疫苗以及禽流感、鸭病毒性肝炎等多种病毒病疫苗均具有较好的免疫效果和安全性。本文综述了鸭瘟病毒作为疫苗载体的特点、鸭瘟病毒的基因编辑技术和鸭瘟病毒载体疫苗应用研究进展情况,以期为进一步研发鸭瘟病毒载体疫苗提供理论基础,同时也为新发传染病预防提供新策略。
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鸭瘟病毒基因组核酸的提取方法比较
《山东师范大学学报(自然科学版) 》 2008
摘要：将鸭瘟病毒分离株SD-01在鸡胚成纤维细胞上增殖.收集病变细胞及培养液,采用两种方法提取病毒基因组核酸.第一种方法,首先用差速离心的方法纯化病毒粒子,然后用酚/氯仿抽提的方法提取病毒基因组.第二种方法,先用高渗缓冲液将感染DPV的细胞完全裂解,然后加入微球菌核酸酶消化细胞DNA,最后用酚/氯仿抽提.限制性内切酶EcoRⅠ消化,结果表明,第一种方法提取的样品中含有细胞DNA,酶切后为弥散模糊的拖带,而方法二可以最大限度的消除细胞DNA污染,得到纯净的病毒基因组DNA,酶切后为清晰的梯状条带.
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鸭瘟病毒基因组的提取和限制性酶切分析
《中国家禽 》 2007 北大核心
摘要：利用高渗缓冲液裂解感染鸭瘟病毒的鸭胚成纤维细胞,加入核酸酶消化细胞DNA,再抽提病毒DNA的方法提取鸭瘟病毒基因组,结果证明,这种方法可以最大限度地消除细胞DNA的污染,得到纯净的病毒基因组DNA。用10种限制性内切酶对鸭瘟病毒疫苗株和分离株的基因组进行酶切分析,酶切产物电泳结果表明,SmaⅠ、SalⅠ、PstⅠ、NotⅠ、HindⅢ、EcoRⅤ和BamHⅠ7种限制酶产生酶切图谱二者几乎完全一致,EcoRⅠ和SacⅠ仅有个别条带不同,BglⅡ产生的条带迁移率差别较大,但条带数量相同。
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山东省鸭瘟病毒jh株的分离鉴定
《中国畜牧兽医 》 2005
摘要：从山东省某疑似鸭瘟发病区分离到1株病毒,经血清中和试验、动物回归试验鉴定为鸭瘟病毒。该毒株与鸭瘟标准强毒的血清型一致,对氯仿敏感,无血凝特性,鸭胚半数致死量DELD50为10-4.02/0.2 ml。根据GenBank中鸭瘟病毒的UL6和UL7基因序列,合成1对引物,对该分离株进行PCR鉴定,结果表明,所扩增片段与参考序列AF043730的同源性为99.7%。
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PCR用于鸭瘟病毒诊断的研究
《中国预防兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：根据鸭瘟病毒UL6和UL7基因序列,设计合成了一对引物,以2株疫苗株1、株强毒株和1株山东分离株DNA为模板,进行PCR扩增,得到预期690 bp的目的片段。将扩增的目的片段克隆到pMD18_T载体,经Amp平板筛选,HindIII、BamHI双酶切鉴定,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定,与参考序列比较,山东分离株与参考序列的同源性为99.7%,其余3株DPV与参考序列的同源性均为100%。应用PCR可检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织中的鸭瘟病毒,表明PCR检测鸭瘟病毒具有很高的特异性、敏感性,该法能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。
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