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鸭瘟病毒基因组核酸的提取方法比较

文献类型： 中文期刊

作者： 李子剑 1 ; 李玉峰 2 ; 陈苏 1 ; 宋敏训 2 ; 李云龙 1 ;

作者机构： 1.山东师范大学生命科学学院动物抗性生物学重点实验室

2.山东省农业科学院家禽研究所禽病诊断与免疫重点实验室

关键词： 鸭瘟病毒;基因组核酸;微球菌核酸酶

期刊名称： 山东师范大学学报(自然科学版)

ISSN： 1001-4748

年卷期： 2008 年 23 卷 01 期

页码： 134-136

摘要： 将鸭瘟病毒分离株SD-01在鸡胚成纤维细胞上增殖.收集病变细胞及培养液,采用两种方法提取病毒基因组核酸.第一种方法,首先用差速离心的方法纯化病毒粒子,然后用酚/氯仿抽提的方法提取病毒基因组.第二种方法,先用高渗缓冲液将感染DPV的细胞完全裂解,然后加入微球菌核酸酶消化细胞DNA,最后用酚/氯仿抽提.限制性内切酶EcoRⅠ消化,结果表明,第一种方法提取的样品中含有细胞DNA,酶切后为弥散模糊的拖带,而方法二可以最大限度的消除细胞DNA污染,得到纯净的病毒基因组DNA,酶切后为清晰的梯状条带.

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