科研产出
瞬时过表达MnERF2基因对桑树耐盐性的影响
《山东农业科学 》 2022 北大核心
摘要：为探明桑树AP2/ERF转录因子MnERF2基因对桑树耐盐胁迫能力的影响,利用构建好的植物过表达和抑制表达载体瞬时转化桑树,并比较分析NaCl胁迫前后瞬时转化桑树中的活性氧(ROS)含量、抗氧化酶活性、抗氧化物质含量以及抗氧化酶基因的表达量,以综合评定MnERF2基因的耐盐功能.通过荧光定量RT-PCR对盐胁迫后MnERF2表达量的分析显示,成功获得MnERF2基因瞬时过表达(OE)、抑制表达(RNAi)转基因植株.进一步的生理指标分析结果显示,不同时间盐胁迫下瞬时过表达MnERF2植株中的ROS(O2·-、H2 O2、·OH)和丙二醛(MDA)含量明显低于对照和RNAi株系,过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性以及抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、脯氨酸含量高于对照和RNAi株系,且48 h处理下SOD、POD、CAT三种酶基因表达量显著高于对照和RNAi株系.说明MnERF2基因响应桑树的盐胁迫,通过提高植株的保护酶活性和抗氧化物质含量、降低活性氧氧化及细胞损伤程度提高桑树的耐盐能力.
关键词： 桑树 AP2/ERF转录因子 MnERF2基因 NaCl胁迫 瞬时表达 耐盐性
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洋葱ANS基因启动子的克隆与瞬时表达分析
《山东农业科学 》 2013
摘要：通过PCR方法对洋葱花青素合成酶基因(AcANS)上游启动子序列进行扩增,获得长度为1.8 kb和2.2 kb的两种片段,命名为ANSPM1和ANSPM2.序列分析表明,克隆到的两个启动子除含有多个TATA-box、CAAT-box等基本启动子元件,还含有与MYB转录因子结合的元件,以及参与光响应、逆境、激素应答的顺式作用元件.同时构建ANSPM1和ANSPM2驱动GUS报告基因的植物表达载体,通过洋葱表皮细胞瞬时表达分析,表明两个启动子均有活性.
关键词： 洋葱 花青素合成酶基因(ANS) 启动子 克隆 瞬时表达
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含CpG序列PRRSV SD2 E基因真核表达载体质粒构建及表达
《西北农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：为了提高猪生殖与呼吸综合征病毒山东株(PRRSV SD2株)基因免疫的效果,将PRRSV SD2 E基因插入哺乳动物表达载体PVAX1中,构建出PVAX1-E质粒。再将已筛选出的CpG-ODN序列通过在其两端的粘性酶切末端定向插入含PVAX 1-E的真核表达载体,构建含CpG基因序列真核重组表达质粒CpG-pVAX 1-E。将重组质粒转染COS-7细胞,经RT-PCR检测E基因mRNA的转录和间接免疫荧光试验(IFA)证实:CpG-pVAX 1-E可表达PRRSV GP5蛋白。试验结果为进一步研究PRRSV SD2 ORF5动物免疫反应奠定基础。
关键词： 猪生殖与呼吸综合征病毒山东SD2株 E基因 真核表达载体 瞬时表达
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