科研产出
副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立及应用
《山东农业科学 》 2020
摘要：本试验针对副猪嗜血杆菌的16S rRNA基因设计环介导等温扩增(LAMP)引物,建立副猪嗜血杆菌LAMP方法,并进行特异性和灵敏度试验.结果显示,建立的LAMP检测方法特异性良好,与其它5种细菌无交叉反应,灵敏度为10-4 ng/μL.分别使用LAMP和PCR方法对30份临床采集样品进行检测,阳性检出率均为40%,符合率100%.本试验建立的LAMP检测方法不需要特殊的仪器设备,可用于副猪嗜血杆菌的鉴定.
全文链接
请求原文
环介导等温扩增技术在畜禽病原微生物检测中的应用及进展
《山东农业科学 》 2020
摘要：畜禽食品安全一直是全世界公共健康的关注焦点.环介导等温扩增(LAMP)是在等温条件下对目标DNA序列进行扩增的一种技术,在微生物检测方面,与常规技术相比,具有方法简单、特异性强、便于观察结果、不需要精密仪器等优势.该文主要对LAMP在畜禽微生物检测上的应用及进展进行综述,并对其优缺点进行分析.
全文链接
请求原文
荧光显色技术在鸭坦布苏病毒LAMP检测方法中的应用及比较
《中国兽医科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：参考NCBI中已收录的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因保守区域设计了6条引物,通过对反应体系中各组分和条件进行优化,建立了DTMUV环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并应用荧光显色剂(SYBR GreenⅠ和钙黄绿素、锰离子)对扩增产物进行可视化判定。结果显示,以SYBR GreenⅠ为染料,显色敏感性为10copies/μL的病毒,比普通PCR高100倍;以钙黄绿素和锰离子组合作为显色剂,其显色极限为1 000copies/μL的病毒,虽低于SYBR GreenⅠ的显色敏感性,但能有效地避免气溶胶造成的空气环境污染。结果表明,本研究建立的荧光显色LAMP体系敏感性高、能避免交叉污染,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力,能够为从源头遏制该病的发生和蔓延提供有效的手段。
全文链接
请求原文
基于荧光显色的IBV LAMP检测方法研究
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立基于荧光显色的可视化禽传染性支气管炎病毒(IBV)环介导等温扩增(LAMP)检测体系,为IBV的快速临床检测提供有力的技术支持。【方法】根据NCBI中收录的IBV 5a+5b基因的8个区域设计了3对LAMP引物,通过对反应体系各组分和条件的优化,建立IBV LAMP检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证。分别用SYBR Green I和一定浓度比的钙黄绿素/锰离子混合物作为显色剂,对IBV LAMP检测结果进行可视化判定。应用该检测体系和PCR方法对临床送检的60份样品同时进行检测,比较2种方法的阳性检出率。【结果】成功建立了IBV LAMP检测方法,该方法能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低可以检出1拷贝/μL的阳性重组质粒,比普通PCR方法敏感100倍,而对其他病毒检测结果均为阴性。应用SYBR Green I和钙黄绿素/锰离子显色时,阴阳性样品均有强烈的颜色对比,其中0.05mmol/L钙黄绿素与0.6mmol/L锰离子混合液可以用于LAMP扩增产物的判断,其结果与琼脂糖凝胶电泳结果一致。在对60份临床样本的检测中,LAMP和PCR方法检测出的阳性样本数量分别为49份和42份。【结论】建立了基于荧光显色的IBVLAMP检测方法,该方法具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力。
关键词： 传染性支气管炎病毒 环介导等温扩增 荧光显色 钙黄绿素
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
