文献类型： 中文期刊

作者： 张伟 ¹ ; 逯茂洋 ² ; 黄庆华 ² ; 杨少华 ² ; 胡北侠 ² ; 许传田 ² ; 伊惠 ² ; 张琳 ² ; 张秀美 ² ;

作者机构： 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室

2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室;山东农业大学动物科技学院;中国农业大学

关键词： 鸭坦布苏病毒;环介导等温扩增;荧光显色剂

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 04 期

页码： 406-411

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参考NCBI中已收录的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因保守区域设计了6条引物,通过对反应体系中各组分和条件进行优化,建立了DTMUV环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并应用荧光显色剂(SYBR GreenⅠ和钙黄绿素、锰离子)对扩增产物进行可视化判定。结果显示,以SYBR GreenⅠ为染料,显色敏感性为10copies/μL的病毒,比普通PCR高100倍;以钙黄绿素和锰离子组合作为显色剂,其显色极限为1 000copies/μL的病毒,虽低于SYBR GreenⅠ的显色敏感性,但能有效地避免气溶胶造成的空气环境污染。结果表明,本研究建立的荧光显色LAMP体系敏感性高、能避免交叉污染,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力,能够为从源头遏制该病的发生和蔓延提供有效的手段。