科研产出
氯化铯密度梯度离心法提纯枣疯病植原体DNA
《山东农业科学 》 2017
摘要：本研究利用CTAB法提取感染枣疯病的枣树叶片总DNA,再通过氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心从总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。利用枣树26S r DNA基因和枣疯病植原体16S r DNA基因的特异引物,分别对富集纯化前后感病枣树叶片总DNA进行PCR扩增。结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,富集后的总DNA模板扩增枣树26S r DNA的电泳条带亮度低于富集前,扩增枣疯病植原体16S r DNA电泳条带亮度明显高于富集前。Real-time PCR检测结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,纯化后的枣疯病植原体DNA中26S r DNA相对纯化前的量为0.0638,而JWB相对纯化前的量为0.5035,这说明采用氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心法可以有效地从感染枣疯病枣树总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。
关键词： 枣疯病 植原体 CTAB法 氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心
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Ca~(2+)对CcRIPⅡ-2基因转化宁阳大枣的影响
《山东农业大学学报(自然科学版) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本研究应用农杆菌介导的方法,采用L_9(3~4)正交试验设计,对影响宁阳大枣基因转化的各项因子进行了分析比较,并着重探索了Ca~(2+)浓度对侵染转化的影响。结果表明:侵染效率最高的组合为1/2侵染液浓度,20 min侵染时间和0 mg/L Ca~(2+)浓度。Ca~(2+)浓度在提高宁阳大枣基因转化效率方面没有明显促进效果。Ca~(2+)浓度仅对平均分化芽数影响较大,浓度为0 mg/L时,平均分化芽数最多。本试验共获得27株转化苗,试验转化效率为33.33%。
关键词： 农杆菌介导法 香樟核糖体失活蛋白基因 枣疯病 Ca~(2+)浓度
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泰安枣疯病植原体的分子鉴定
《微生物学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对3个枣疯病病原物泰安株系进行分子鉴定。【方法】采用植原体通用引物对R16F2n/R16R2,通过直接PCR技术,扩增枣疯病植原体16S rDNA基因,通过16S rDNA基因序列分析和在线模拟16S rDNA-RFLP分析,并将其16S rDNA基因序列提交到GenBank数据库。【结果】3个枣疯病病原物16S rDNA基因片段与16SrⅤ-B亚组中枣疯病植原体(AB052876和AF279272)、樱桃致死黄化植原体(AY197659)及杏卷叶植原体(FJ572660)的同源性高达99.5%99.7%,分别命名为枣疯病植原体泰安圆铃1号株系(Jujube witches’-broom phytoplasma strain Yuanling1,JWB-Yuanling1,TA)、枣疯病植原体泰安鲁北冬枣株系(Jujube witches’-broom phytoplasma strain Lubeidongzao,JWB-Lubeidongzao,TA)和枣疯病植原体泰安大白铃株系(Jujube witches’-broom phyto-plasma strain Dabailing,JWB-Dabailing,TA),基因登录号分别为:HM989946、HM989947和HM989948。【结论】3个枣疯病植原体泰安株系均归属于16SrⅤ-B亚组。
关键词： 枣疯病 植原体 16S rDNA序列分析 模拟16S rDNA-RFLP分析 分子鉴定
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枣疯病植原体的快速检测
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以表现丛枝症状的‘金丝4号’枣树为试材,以叶片总DNA粗提物为模板通过PCR扩增技术克隆16SrDNA基因,建立了枣疯病植原体快速检测方法。序列分析结果显示,枣疯病植原体‘金丝4号’株系(JWB-Jinsi4,TA)与JWB-G1(AB052876)同源性为99.7%,归属于16SrⅤ-B组。实验结果表明,以DNA粗提物为模板的PCR扩增技术,可快速有效地检测枣疯病植原体,为生产实践中枣疯病的诊断和防治提供技术支持。
关键词： 枣疯病 DNA粗提物 16SrDNA序列分析
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