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氯化铯密度梯度离心法提纯枣疯病植原体DNA

文献类型： 中文期刊

作者： 刘玲雪 1 ; 肖琦 1 ; 杨淑珂 1 ; 路兴波 1 ; 高瑞 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室

关键词： 枣疯病;植原体;CTAB法;氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 134-137

摘要： 本研究利用CTAB法提取感染枣疯病的枣树叶片总DNA,再通过氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心从总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。利用枣树26S r DNA基因和枣疯病植原体16S r DNA基因的特异引物,分别对富集纯化前后感病枣树叶片总DNA进行PCR扩增。结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,富集后的总DNA模板扩增枣树26S r DNA的电泳条带亮度低于富集前,扩增枣疯病植原体16S r DNA电泳条带亮度明显高于富集前。Real-time PCR检测结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,纯化后的枣疯病植原体DNA中26S r DNA相对纯化前的量为0.0638,而JWB相对纯化前的量为0.5035,这说明采用氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心法可以有效地从感染枣疯病枣树总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。

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