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牛A组轮状病毒VP4全基因的克隆与原核表达

文献类型: 会议论文

第一作者:

作者: 南晓伟 1 ;

作者机构: 1.南晓伟@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001 内蒙古农业大学 呼和浩特市 010018--杨少华@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--高运东@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--王长法@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--杨宏军@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--刘晓@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--仲跻峰@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--申之义@内蒙古农业大学 呼和浩特市 010018--何洪彬@山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001--

关键词: 牛轮状病毒;VP4蛋白;基因克隆;原核表达

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 1272-1276

摘要: 以G6型牛轮状病毒总RNA为模板,应用RT.PCR技术扩增牛轮状病毒VP4开放性阅读框,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pEASY-T3载体中,成功构建出克隆质粒pEASY-T3-VP4。经双酶切后再将该基因重组于原核表达载体pET32a(+)中,构建出原核表达质粒pET3a-VP4。将pET32a-VP4转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IgTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约108KD的融合蛋白带,即成功构建了能够稳定表达VP4蛋白的基因工程菌株,这为进一步研制牛轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础。

分类号: S858.23`S852.659.4

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