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牛轮状病毒VP4基因与LTB基因的融合表达及免疫原性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 南晓伟 1 ; 杨少华 1 ; 高运东 1 ; 王长法 1 ; 杨宏军 1 ; 刘晓 1 ; 何洪彬 1 ; 申之义 2 ; 仲跻峰 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心

2.内蒙古农业大学

关键词： 牛轮状病毒;融合基因;原核表达;免疫原性

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2010 年 23 卷 01 期

页码： 206-209

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： PCR扩增轮状病毒VP4基因和大肠杆菌LTB基因编码区,将其克隆至pET32a载体上,构建pET32a-VP4-LTB质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),PCR、酶切鉴定后进一步测序,测序结果表明融合基因片段由2637 bp组成,为编码879个氨基酸残基的多肽。经IPTG诱导和SDS-PAGE检测发现表达产物分子量约为118.9 KD,以包涵体的形式存在。融合蛋白经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化后免疫小鼠,结果所产生的抗体效价高于单独VP4蛋白的免疫结果但差异不显著(P>0.5),但与对照组相比差异显著。表明所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性,为研制牛轮状病毒亚单位疫苗奠定了基础。

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