文献类型: 中文期刊
作者: 张太翔 1 ; 凌宗帅 2 ; 史玉颖 3 ; 高小博 4 ; 田国宁 1 ; 张金玲 1 ; 韩亮 1 ; 张丽萍 1 ;
作者机构: 1.潍坊出入境检验检疫局
2.济南出入境检验检疫局
3.山东省农业科学院家禽研究所
4.北京盈九思科技发展有限公司
关键词: 禽白血病;实时荧光定量RT-PCR;TaqMan探针
期刊名称: 中国兽医杂志
ISSN: 0529-6005
年卷期: 2010 年 46 卷 06 期
页码: 3-6
收录情况: 北大核心
摘要: 建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测禽白血病病毒(ALV)。选取ALV病毒的LTR序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有ALV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。阳性标准品在3.0×102~3.0×107个拷贝共6个数量级的范围内,定量PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度最低为30个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对新城疫病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性囊病病毒、鸡传染性贫血病毒和马立克病病毒核酸都没有扩增反应。实时定量PCR检测ALV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义。
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