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基于已有序列信息快速获得花生目的序列的方法(英文)

文献类型: 中文期刊

作者: 王传堂 1 ; 杨新道 1 ; 陈殿绪 1 ; 张建成 1 ; 刘光臻 1 ; 禹山林 1 ;

作者机构: 1.山东省花生研究所青岛市农业生物技术重点实验室

关键词: 花生;种子特异性表达;序列信息;分离;方法

期刊名称: 花生学报

ISSN: 1002-4093

年卷期: 2004 年 33 卷 03 期

页码: 15-17

摘要: 提出了一套基于已有DNA序列信息快速获得花生目的序列的技术流程。运用花生籽仁未成熟叶片简单预处理PCR技术,根据一个种子中特异表达的基因cDNA序列设计特异性引物,用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增,4个花生基因型中有3个得到预期长度的产物。随后取其中育种品系02 B4籽仁未成熟叶片,简单预处理后采用PyrobestDNA聚合酶作高保真扩增,得到产物后直接测序。结果表明,该基因片段与已报道的花生PSC33羽扇豆球蛋白cDNA序列表现出高度同源性。本研究为分离其编码区上下游序列奠定了基础。

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