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鸭黄病毒巢式PCR检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

作者： 张琳 1 ; 胡北侠 1 ; 颜世敢 1 ; 杨少华 1 ; 许传田 1 ; 张秀美 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 黄病毒;通用引物;巢式PCR;鸭;敏感性

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2012 年 V 卷 02 期

页码： 124-129

摘要： 参照GeneBank已登录的黄病毒基因序列设计通用引物,建立基于黄病毒通用引物的巢式PCR检测体系,为黄病毒特别是新发黄病毒提供了高效的检测方法。该方法通过基因组的比对,选择NS5基因保守区设计了4条通用简并引物Flav P1～Flav P4,在此基础上建立了巢式PCR反应体系,并应用到鸭黄病毒的检测中。该体系仅能扩增鸭黄病毒目的基因而不能扩增其他病毒,且敏感性达到90copies.μL-1,比普通PCR高出1 000倍。同源性和进化分析表明,鸭黄病毒属蚊媒黄病毒类恩塔亚病毒群,与坦布苏病毒及近期发现的BYD病毒关系最近。以上结果表明,设计的黄病毒引物具有良好的通用性和特异性,其巢式PCR敏感性高,该体系成功地进行了鸭黄病毒的检测,验证了该方法的敏感性和特异性。

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