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唾液乳杆菌BSH1及其突变体的底物特异性

文献类型： 中文期刊

作者： 毕洁 1 ; 方芳 1 ; 仇钰莹 1 ; 杨庆利 2 ; 陈坚 1 ;

作者机构： 1.江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室

2.山东省花生研究所

关键词： 唾液乳杆菌;胆盐水解酶;定点突变;同源建模;底物特异性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2014 年 30 卷 03 期

页码： 445-454

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了解析胆盐水解酶催化中心中关键氨基酸位点与其底物特异性的关系,以大肠杆菌pET-20b(+)表达系统为分子改造平台,采用理性设计,结合氨基酸定点突变的方法,成功构建了唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius胆盐水解酶BSH1的7种突变体。通过对比L.salivarius BSH1及其突变体对6种结合胆盐的底物特异性表明,7种突变体对不同的结合胆盐的水解活性有所改变。结果说明,Cys2和Thr264分别是BSH1催化TCA和GCA的关键残基,且对酶的催化活性的保持具有关键作用。其中,高保守性的氨基酸位点Cys2不是BSH1唯一的活性位点,而其他突变的氨基酸位点可能作为BSH1的结合位点参与了底物的结合,也可能影响了底物进入BSH1活性中心的通道或底物结合口袋的体积与形状,进而影响了BSH1对不同结合胆盐的水解活性。

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[1]唾液乳杆菌SNK-6和饲粮粗蛋白质水平对汶上芦花鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和肠道组织形态的影响. 刘玮,韩海霞,李大鹏,雷秋霞,严华祥,周艳,刘杰,王杰,曹顶国,李惠敏,陈甫,李福伟. 2023

[2]唾液乳杆菌SNK-6对海兰褐蛋鸡成活率、蛋品质和蛋壳表面微生物的影响. 卫利春,李福伟,吴宁,陈晓健,朱根生,朱丽慧,卢奎,朱永豪,涂盈盈,严华祥. 2022

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