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鸭肠炎病毒SORF3基因的克隆及表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 刘存霞 1 ; 吴静 1 ; 田雪 1 ; 赵巧雅 1 ; 路晓 1 ; 王林 1 ; 李玉峰 1 ; 宋敏训 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院家禽研究所家禽疫病诊断与免疫重点实验室;济南亿民动物药业有限公司

关键词: 鸭肠炎病毒;SORF3;原核表达

期刊名称: 家禽科学

ISSN: 1673-1085

年卷期: 2018 年 11 期

页码: 34-37

摘要: 克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE及Werstern-blot鉴定。结果构建的原核表达质粒pET32aSORF3转化BL21后经IPTG诱导4h,可表达分子量约50kDa融合蛋白,Western blot显示重组蛋白可以被Anti-His标签抗体识别,表明成功构建了pET32a-SORF3原核表达质粒,并能在大肠杆菌中表达具有免疫反应性的SORF3,为SORF3基因的功能研究奠定基础。

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