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多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张金强 1 ; 吴家强 1 ; 孟斌 2 ; 郭文龙 2 ; 王希辉 2 ; 李坤 1 ; 于江 1 ; 刘少宁 1 ; 张玉玉 1 ; 王金宝 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

2.山东农业大学动物科技学院

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪瘟病毒;多重PCR;ORF5基因

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2011 年 31 卷 05 期

页码: 633-637

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的基因组序列设计了2对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法。2008年1月至2009年12月期间,采集山东各地71个不同规模猪场及农村散养户212份病料,采用建立的多重RT-PCR技术同时检测PRRSV和CSFV的感染状况。检测结果显示,病料中高致病性PRRSV占57.1%(121/212),CSFV占29.2%(62/212)。应用RT-PCR方法扩增山东不同地区16株PRRSV的ORF5基因,并进行了序列分析。结果表明,16株PRRSV的ORF5基因核苷酸同源性为97.0%~100.0%;与参考变异毒株JXA1、传统毒株VR2332核苷酸同源性分别为98.0%~99.5%和86.4%~87.7%。推导的氨基酸序列分析表明,16株毒株GP5蛋白氨基酸不存在缺失,但存在位点突变。12株在非中和表位29位点与准种进化34位点发生了突变,分别由V→A和N→S;1株在非中和表位185位点发生突变,由A→V;这与2007年流行的PRRSV毒株JXA1、HUN等不同。

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