文献类型： 中文期刊
作者： 赵鸿雁 1 ; 李俊 2 ; 丛晓燕 1 ; 曹帅 1 ; 王文志 2 ; 张秀美 2 ; 王金宝 2 ;
作者机构： 1.莱阳农学院动物科技学院
2.山东省农业科学院畜牧兽医所
关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2;猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF5;真核表达载体
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2006 年 27 卷 11 期
页码： 65-68
摘要： 根据GenBank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因序列,分别设计一对引物,应用PCR和RT-PCR扩增出PCV-2 ORF2基因和PRRSV ORF5基因。将PCR产物ORF2经NheⅠ/EcoRⅠ双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-ORF2,RT-PCR产物ORF5经NotⅠ/XbaⅠ双酶切回收后插入pIRES-ORF2构建重组质粒pIRES-ORF2/ORF5。对此质粒中的插入片段,进行PCR RT-PCR及双酶切鉴定,同时对插入序列进行测序分析,表明SD1株ORF2与国内多种毒株的同源性为99%,pIRES-ORF2ORF5转移载体ORF5基因的核苷酸推导氨基酸与北美洲原型(VR-2332株)氨基酸同源性为99%。此重组表达载体的成功构建,为进一步研究PCV-2 ORF2及PRRSV ORF5编码蛋白的生物学活性及研究猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二联核酸疫苗奠定了基础。
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