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鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立与初步应用

文献类型: 中文期刊

作者: 马秀丽 1 ; 冯涛 2 ; 宋敏训 3 ; 李峰 3 ; 廖明 1 ; 辛朝安 1 ;

作者机构: 1.华南农业大学兽医学院

2.山东省兽药监察所

3.山东省农科院家禽研究所

关键词: 鸭病毒性肝炎病毒;Ⅰ型;RT-PCR;检测

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2007 年 07 期

页码: 83-86

收录情况: CSCD

摘要: 根据GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列设计、合成引物,以山东、江苏、广东等地分离株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到预期大小的目的片段。将山东分离株扩增的目的片段克隆到pGM-T载体,酶切鉴定得到阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定,与参考毒株R85952的序列比较发现,山东分离株与参考序列的同源性为97.4%。试验结果表明,所建立的RT-PCR方法最低模板检出量为100 pg,且该方法只能特异地检测出DHV,不能检出鸭瘟病毒、小鹅瘟病毒、鹅副粘病毒和番鸭细小病毒等。自然感染病料的检测分离结果表明,该方法既可用于DHV-Ⅰ分离株的快速鉴定,也可用于临床感染病例的检测与诊断。

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