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新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 徐敏丽 1 ; 于江 1 ; 逯璐 2 ; 张玉玉 1 ; 任素芳 1 ; 陈智 1 ; 孙文博 1 ; 郭立辉 1 ; 吴家强 1 ; 张琳 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室

2.山东管理学院新兴业态发展研究所

关键词： 新城疫病毒;强毒;反转录荧光定量PCR;监测

期刊名称： 山东农业科学

ISSN：

年卷期： 2021 年 008 期

页码： 112-118

摘要： 为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）特异性反转录荧光定量PCR（reverse transcription fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR）检测方法,基于对所有已知NDV F基因序列特征的分析,设计了一对强毒特异性引物,以体外转录制备的RNA标准品为阳性模板,构建了标准曲线,并对该方法的敏感性、特异性和准确性进行了验证。结果表明,基于SYBR GreenⅠ嵌合荧光技术建立的检测方法能够特异性扩增NDV强毒,最低可检测1拷贝/μL的RNA,用于临床毒株的检测结果与序列测定一致,可作为适合大规模监测NDV强毒的方法和工具。

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