文献类型： 中文期刊
作者： 程凯慧 1 ; 侯佩莉 1 ; 宋玲玲 1 ; 赵贵民 1 ; 郇延军 1 ; 王洪梅 1 ; 何洪彬 1 ;
作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词： 口蹄疫;RT-PCR;A型;O型;Asia1型
期刊名称： 中国病原生物学杂志
ISSN： 1673-5234
年卷期： 2015 年 09 期
页码： 774-777
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的建立口蹄疫流行株不同血清型RT-PCR的鉴别诊断技术,为有效防控口蹄疫提供技术支撑。方法根据GenBank中的A型、O型、Asia1型口蹄疫病毒的全基因组核酸序列,用Primer 5.0设计该3型口蹄疫病毒的通用引物及特异性分型引物,建立RT-PCR方法,采用1%琼脂糖凝胶电泳结合测序技术对引物的特异性和广谱性进行分析。结果 1%琼脂糖电泳结果表明通用引物P1/P2能同时特异性扩增A、O、Asia1型口蹄疫病毒,扩增片段大小为457bp,与预期值相一致。A、O、Asia1型分型引物只能扩增相应亚型口蹄疫病毒的目的基因片段(大小分别为320、240和460bp),与预期值相一致。不能扩增其他2种亚型。Blast比对显示分型引物扩增产物序列经测序验证与其亚型完全对应,同源性为84%~99%。结论建立的RT-PCR诊断技术对口蹄疫病毒通用型扩增具有广谱性,对基因亚型分型具有特异性,可用于口蹄疫病检测及其流行病学调查。
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