文献类型: 中文期刊
作者: 李艳梅 1 ; 褚新星 2 ; 吴春涛 1 ; 聂玉霞 3 ; 肖连明 3 ;
作者机构: 1.东营职业学院
2.山东农业大学动物科技学院
3.山东省蚕业研究所
关键词: C3d;RT-PCR;亲和层析;MTT;血凝抑制试验
期刊名称: 西南农业学报
ISSN: 1001-4829
年卷期: 2008 年 21 卷 04 期
页码: 1126-1130
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研究、利用鸡补体C3d奠定了基础。
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