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狂犬病诊断基因芯片的建立和检测应用的初步研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张伟 1 ; 吴时友 2 ; 尹燕博 2 ; 牛钟相 3 ; 张秀美 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院

2.山东澳兰生物工程研究院

3.山东农业大学动物科技学院

关键词： 狂犬病病毒;基因芯片;间接ELISA;(RT)PCR

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 02 期

页码： 132-135

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据已发表的狂犬病病毒(RV)的序列,设计合成能扩增高度保守核(N)蛋白片断的一对引物。通过生物素标记PCR技术,将核(N)蛋白基因片断作为探针点在硝酸素纤维膜上,制作成疾病诊断基因芯片。取160份可疑动物的血液,提取核酸作模板进行PCR扩增,将其产物与诊断基因芯片进行特异性逆向点杂交检测;并用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化狂犬病病毒作抗原,建立检测RV抗体的间接ELISA。把以上两种方法应用于临床,结果基因芯片的检测率比ELISA方法和(RT)PCR要高15%左右,表明建立的狂犬病诊断基因芯片具有更高的灵敏度和特异性。

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