文献类型： 中文期刊

作者： 吴晓燕 ¹ ; 刘涛 ² ; 李俊 ² ; 时建立 ² ; 韩偲 ¹ ; 刘洋 ¹ ; 吴家强 ² ; 周顺 ¹ ; 王金宝 ¹ ;

作者机构： 1.青岛农业大学动物科技学院

2.山东省农业科学院

关键词： 猪圆环病毒2型;SYBR Green I;荧光定量PCR;特异性

期刊名称： 家畜生态学报

ISSN： 1673-1182

年卷期： 2011 年 32 卷 02 期

页码： 41-46

摘要： 研究旨在建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测PCV 2的技术方法。根据GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV 2)的基因序列(HQ148879),设计一对特异性引物,利用普通PCR技术扩增出PCV 2的ORF2基因702bp片段,并克隆到pVAX1载体,以纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为阳性标准品,摸索荧光定量PCR试验,并绘制标准曲线,以此建立一种荧光定量PCR特异性检测猪圆环病毒的方法。结果表明,该方法对PCV 2有很好的特异性,其敏感性比常规PCR高100倍,批间与批内重复试验变异系数均小于2.5%。经临床应用表明荧光定量PCR方法的建立实现了对PCV 2特异性的快速诊断和定量检测。