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苹果NAD–苹果酸酶基因的克隆及在不同组织和果实发育阶段的表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 董庆龙 1 ; 余贤美 2 ; 刘丹丹 2 ; 王海荣 2 ; 安淼 2 ; 姚玉新 2 ; 王长君 2 ;

作者机构: 1.山东省果树研究所

2.山东省果树研究所;山东农业大学园艺科学与工程学院,国家苹果工程技术研究中心,作物生物学国家重点实验室

关键词: 苹果;苹果酸酶;克隆;序列分析;表达分析

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2013 年 40 卷 04 期

页码: 739-748

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: NAD-malic enzyme(NAD-ME)是植物调控苹果酸代谢中的关键酶。以富士苹果(Malus×domestica Borkh.)叶片为试材,通过同源比对和RT-PCR技术,克隆获得2个NAD–苹果酸酶基因(MdNAD-ME1和MdNAD-ME2)。其ORF分别为1 785 bp和1 818 bp,推测其分别编码595和605个氨基酸的多肽。氨基酸序列和结构分析显示,含有5个保守的氨基酸区域(Ⅰ~Ⅴ),包含2个功能结构域:malic和NAD_bind_1_malic_enz。进化树分析结果显示,MdNAD-ME1属于α组双子叶亚组,MdNAD-ME2属于β组双子叶亚组。荧光实时定量结果显示,MdNAD-ME在被检测的组织中呈组成型表达,且在多种组织中MdNAD-ME1表达量高于MdNAD-ME2。在富士苹果果实不同发育阶段,MdNAD-ME1与MdNAD-ME2具有不同的表达模式。以上结果表明,克隆得到的MdNAD-ME1和MdNAD-ME2属于植物NAD-ME,在苹果的生长和发育过程中MdNAD-ME1和MdNAD-ME2可能起到不同作用。

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