科研产出
检测奶牛乳房炎主要病原菌的多重PCR方法的建立与应用
《中国兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：本试验针对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌3种主要的乳房炎病原菌设计了3对特异性引物,建立了多重PCR检测方法。结果表明,本方法的特异性为100%,最低检测浓度为1.25×103cfu/mL,充分表明该方法具有快速,准确和特异的优点。
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中国荷斯坦牛GlyCAM1基因遗传多态性与乳房炎关联性分析
《中国农业科技导报 》 2008
摘要：以273头中国荷斯坦牛为研究对象,利用CRS-PCR、PCR-SSCP及DNA测序技术检测糖基化依赖细胞粘附分子1(GlyCAM1)基因外显子3、内含子3的遗传多态性。结果表明:GlyCAM1基因分别在外显子3和内含子3的第2081(A/C)、2417(C/T)位存在突变,两位点在牛群中的等位基因频率A/B分别为0.752 5/0.2475,0.904 6/0.095 4;经χ2适合性检验,中国荷斯坦牛群2417位点的突变达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),但2081位点的突变未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。采用最小二乘法拟合线性模型将该基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析,结果表明:胎次效应(P<0.01)、场效应(P<0.01)和泌乳月(P<0.05)对乳房炎的影响较大。2081位基因型效应对SCS的影响达到了显著水平(P<0.05),且AA基因型个体的SCS显著低于AB和BB基因型个体(P<0.05)。
关键词： 中国荷斯坦牛 糖基化依赖细胞粘附分子1基因 遗传多态性 SCS 乳房炎
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奶牛乳腺炎病原学比较研究
《家畜生态学报 》 2008
摘要：针对大型奶牛场和部分散养户的奶牛,对乳腺炎阳性和阴性乳汁进行细菌分离培养计数和生化鉴定,对分离到的病原菌做药物敏感性试验。试验中分离出的细菌主要是葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、棒状杆菌和酵母菌。经过生化鉴定,乳腺炎阳性乳分离得到的细菌大多数是明显溶血的,凝固酶反应呈阳性的强致病菌,细菌计数也高于乳腺炎阴性组,差异极显著;而乳腺炎阴性乳中所分离得到的细菌大多是环境中条件性致病菌,致病性不强。
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金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。
关键词： 金黄色葡萄球菌 乳腺炎 粘附素 纤连蛋白连接蛋白A
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奶牛乳房炎的生物学防治
《动物医学进展 》 2007
摘要：奶牛乳房炎是对奶牛业危害最严重的疾病之一。目前治疗奶牛乳房炎仍以抗生素为主,生物学方法防治奶牛乳房炎,无残留、副作用小、不影响牛乳品质,愈来愈受到人们的关注,已经成为研究的热点。在国外,已经有生物制品和生物技术应用于临床,并取得了很大的成功。用于奶牛乳房炎的生物学防治方法有很多,文章重点对国内外在奶牛乳房炎生物学防治方面已经取得的成就进行总结,包括细菌素、抗菌肽、乳铁蛋白、乳铁素、生物性制剂、基因疗法和生物疗法等。
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奶牛乳腺炎诊断方法研究进展
《中国牛业科学 》 2007
摘要：奶牛乳腺炎的诊断方法有很多,临床乳腺炎可根据临床症状进行诊断,用于隐性乳腺炎的诊断方法有乳汁细胞学检查、乳汁的细菌培养、电导率测定、pH值的检查、乳清电泳诊断法、酶检测法、PCR检测方法、被毛微量元素检验法以及其它衍生方法。本文对奶牛乳房炎诊断研究进展作了系统的介绍。
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PCR扩增Nuc基因检测奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌
《家畜生态学报 》 2007
摘要：为建立奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌致病菌株的检测方法,依据金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列,设计合成特异性引物,通过聚合酶链式反应扩增Nuc基因,并将扩增基因克隆入T载体,进行序列测定,对所分离的奶牛乳腺炎病原菌进行鉴定。结果显示:金黄色葡萄球菌扩增出特异性条带,大小为694bp;其他菌株未出现条带。敏感性检测的最低浓度为1.25×103cfu/mL。本试验所建立的方法具有特异性强、敏感度高的特点。
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MHC基因与奶牛乳房炎相关性研究进展
《中国奶牛 》 2007
摘要：奶牛乳房炎是一种严重危害奶牛生产的疾病,它的发生与管理、环境、遗传等多种因素有关。组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)基因在动物机体的免疫系统中占有重要地位,并且存在极其丰富的多态性。MHC的部分等位基因型与奶牛乳房炎存在密切的相关性。本文对奶牛MHC基因多态性与乳房炎相关性进行了综述。
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后海穴免疫与常规免疫奶牛乳腺炎三联灭活苗的效力比较
《中国奶牛 》 2007
摘要：本研究旨在通过对奶牛乳腺炎三联灭活苗在后海穴注射免疫与常规注射免疫的效力比较,寻找更为有效、方便的免疫途径。本试验以荷斯坦奶牛为试验动物,分别在后海穴、臀肌和皮下接种乳腺炎灭活疫苗,比较其免疫效力,结果显示后海穴免疫首先能节省疫苗用量,同时还可以提前产生免疫力,显著提高(P<0.01)血清中的抗体水平;其次接种疫苗时因针刺穴位的作用,显著提高了血液中的白细胞总数和淋巴细胞数,增强了免疫细胞的功能;最后显著降低(P<0.01)乳汁中的体细胞数。
关键词： 奶牛乳腺炎 免疫途径 后海穴免疫 臀肌免疫 皮下免疫
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